wwwkkk83 发表于 2015-4-7 11:10:18

艾滋病的诊断检测

艾滋病毒检测通过检查血液中是否存在艾滋病毒抗体,来显示感染状况。为对
抗外来病原体,人体免疫系统产生抗体。多数人在感染艾滋病毒后通常有3至 6周“窗
口期”,在此期间,人体仍在产生艾滋病毒抗体,但这些抗体尚无法测出。这一最初
感染期感染性最强,但在各感染期都可能会传播艾滋病毒。如果有人近期有可能接
触到了艾滋病毒,那么 6 周后应进行复检,以证实检查结果。这可使感染者有足够
时间产生抗体。
检测 HIV 感染者体液中病毒抗原和抗体的方法,操作方便,易于普及应用,其中抗体
检测尤普通。但 HIv P24 抗原和病毒基因的测定,在 HIV 感染检测中的地位和重要性也日益
受到重视。

抗体检测
主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA)。ELISA 用去污剂裂解 HIV
或感染细胞液提取物作抗原,IFA 用感染细胞涂片作抗原进行抗体检测,如果发现阳性标本
应重复一次。为防止假阳性,可做 Western blotting (WB,蛋白印迹法)进一步确证。
WB 法是用聚丙烯酰胺凝胶电泳将 HIV 蛋白进行分离,再经传移电泳将不同蛋白条带转
移于硝酸纤维膜上,加入病人血清孵育后,用抗人球蛋白酶标抗体染色,就能测出针对不同
结构蛋白抗体,如抗 gp120、gp41、P24 抗体,特异性较高。

HIV 抗体检测结果有两种可能,HIV 阳性或 HIV 阴性。
HIV阴性
说明从人体内检测不到 HIV 抗体,阴性符号以(-)表示。不能说没有感染 HIV, 要
看是什么时候检测的,在窗口期内,感染者的体内还没有产生 HIV 抗体,或还没有
产生足量的 HIV 抗体,这时 HIV 检测是阴性结果,如果在窗口期之后检测的,可以
排除感染 HIV 的可能。

HIV阳性
说明从人体内检测到了 HIV 抗体,阳性符号以(+)表示。
检测结果
感染还处于窗口期:从 HIV 进入体内到检测这段时间还不够长,因此血清还没
有形成典型的抗体反应
艾滋病进展到终末期,抗体水平下降
不定因素
其他非病毒蛋白抗体的交叉反应:自身免疫性疾病、某些恶性疾病、怀孕、输
血或器官移植等情况下,身体可以产生一些抗体,其反应与 HIVP24 核心蛋白抗
体引起的反应很相似

抗原检测
HIV-1 P24 抗原检测可用于 HIV-1 抗体不确定或窗口期的辅助诊断;HIV-1 抗体阳性母
亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断;第四代 HIV-1 抗原/抗体 ELISA 试剂检测呈阳性,但 HIV-1
抗体确认阴性者的辅助诊断。P24 抗原检测一般用 ELISA 双抗体夹心法试剂,试剂必须经过
SDA 批准注册、在有效期内,其阳性结果必须依据试剂说明书经中和试验确认。HIV-1P24
抗原检测的敏感性为 30-90%,该结果仅作为 HIV 感染的辅助诊断依据,不能据此确诊;HIV-1
P24 抗原检测阴性只表示在本试验中无反应,不能排除 HIV 感染,临床中一般不作为常规诊
断项目。

核酸检测
HIV 核酸检测可用于 HIV 感染的辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效判定、预测
疾病进展等。常用的 HIV 病毒载量检测方法包括逆转录 PCR 实验(RT-PCR)、核酸序列扩增
实验(NASBA)、分支 DNA 杂交实验(bDNA)以及实时荧光定量 PCR 技术。值得注意的是,每
一种 HIVRNA 定量系统都有其最低检测限,即可以测出的最低拷贝数或国际单位,RNA 定量
检测时未测出不等于样品中不含有病毒 RNA,因此 HIV 核酸定性检测阴性,只可报告本次实
验结果阴性,但不能排除 HIV 感染;HIV 核酸检测阳性,可作为诊断 HIV 感染的辅助指标,
不能单独用于 HIV 感染的诊断。报告 HIV 核酸定量检测结果时应按照仪器读数报告结果,注
明使用的实验方法、样品种类和样品量,当测定结果小于最低检测限时,应注明最低检测限
水平。
HIV 核酸定性检测也可用于 HIV 感染的辅助诊断,目前在分析 HIV 基因亚型和变异等基
础研究中应用。通常使用 PCR 或 RT-PCR 技术,使用分子生物学实验室通用的扩增试剂,引
物可来自文献或自行设计,应尽量覆盖所有或常见的毒株,也可使用复合引物。报告定性检
测结果时应注明反应条件和所使用的引物序列。此外,利用核酸检测方法的高度敏感性,使
用集合核酸扩增检测技术和方法,对高度怀疑感染人群且抗体阴性的样品进行集合核酸检
测,可及时发现窗口期感染者。该方法较单份样品的核酸检测具有更高的成本效益。

参考文献
1. 百度百科
2. 世界卫生组织 http://www.who.int
资料整理人: 高茸 国家生物医学分析中心
校核人: 程建华 国家生物医学分析中心




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