樽满秋华 发表于 2015-5-24 20:28:46

BmDNV--2抗性研究

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家蚕浓核病毒(BmDNV)属于细小病毒科浓核病毒亚科,具有非常窄的宿主域和组织特异性。最初在不同的蚕品种中发现的4个不连锁的突变基因:nsd-1,Nid-1,nsd-2,nsd-Z,控制着对两种明显不同的病毒BmDNV-1和BmDNV-2(Z)的不易感性。
BmDNV--2仅能在家蚕中肠柱状细胞内复制,是一种致死性疾病。以往的研究发现,nsd-2基因决定了一些蚕品种表现出了对该病毒的完全抗性,不论是病毒浓度的高低都不具有感染性。
最近研究表明(PNASMay 27, 2008 vol. 105 no. 217523-7527),nsd-2基因对病毒的抗性是由于仅在中肠表达的氨基酸转运蛋白家族的一个12次跨膜蛋白的基因的ORF当中缺失了大约6Kb的片段所引起的。在此项研究中,研究人员根据已有的家蚕基因组信息和RFLP分子标记,通过染色体步移和定位克隆,分离到了nsd-2,推测其为一个氨基酸转运蛋白,由于缺失了12个跨膜结构域中的9个,使得蚕对BmDNV-2有抗性。
    作者还做了一些该基因的表达情况的实验,结果表明该基因仅在家蚕的中肠中有表达,在其他的一些组织中并没有表达,这很有可能是病毒进感染中肠上皮细胞的一个原因。
为了证明该基因对病毒的抗性起关键作用,研究人员还巧妙的设计了一个实验,将GAL4/UAS系统驱动的+ nsd-2的序列转移到抗性蚕品种中去,并在幼虫1龄和4龄的时候检测接种BmDNV-2后的感染性。转基因后代接种病毒后,GAL4/UAS杂交系的蚕表现出来明显的感染症状,而GAL4/UAS杂交系中没有接种病毒的却是正常生长。
可以说,这项研究成功的克隆到来该抗性基因,这是这几个抗性基因首次被克隆定位,很有可以该基因表达的跨膜蛋白就是BmDNV-2的受体。也为其他几个基因的定位提供了参考。
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