H7N9禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与评价
近期，中山大学达安基因股份有限公司研究人员发表论文，旨在应用Taq Man探针实时荧光RT-PCR技术，建立一种快速检测H7N9禽流感病毒的方法。研究指出，建立的检测试剂盒具有快速灵敏、结果准确可靠等优点，适用于H7N9禽流感病毒的分子生物学检测和监测。该文发表在2015年第01期《热带医学杂志》上。针对H7N9禽流感病毒的HA和NA基因分别设计特异性引物和Taq Man-LNA探针，建立H7N9禽流感病毒特异性实时荧光RT-PCR快速检测方法。
本研究建立的方法对检测H7N9禽流感病毒株的灵敏度达到10 PFU/ml。该方法特异性强，与其他亚型流感病毒株及呼吸道病原体无交叉反应。与对照方法相比，本研究方法的检测阳性符合率为99.07%，阴性符合率为100%，Kappa值为0.993。
相关链接： http://med.wanfangdata.com.cn/Journal/rdyxzz.aspx
近期，深圳市疾病预防控制中心，深圳市重大传染病监控重点实验室，深圳市病原微生物资源库建立与应用公共服务平台研究人员发表论文，旨在构建一种可同时检测甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2亚型流感病毒的多重荧光RT-PCR方法。研究指出，本方法所构建检测流感亚型体系具有较好的特异性、灵敏度、可重复性、仪器适用性，适用于各基层疾控及医疗机构。该文发表在2014年第10期《热带医学杂志》上。
根据不同流感亚型HA与NA的差异，设计五对引物及五条探针，构建合适的检测体系，分析特异性、灵敏度、可重复性、仪器适用性，并将其与常用检测试剂盒进行比对。
本研究成功构建多重荧光RT-PCR检测体系，能同时检出甲型H1N1、季节性H1N1及H3N2亚型流感病毒，检测灵敏度为101～102拷贝/μl，可重复性好（变异系数为0.47%～4.03%），比常用检测试剂具有更好的荧光值水平，可适用于多种常见的荧光定量PCR仪。
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