[转移贴]-求助，关于鸡胚尿囊液的污染
yukingboy 28/2/2012 09:37请教大家一个问题 用收获的鸡胚尿囊液加入到肉汤培养基培养 培养基变浑浊 说明鸡胚尿囊液有污染了 可是在肉汤培养基里面加入青链双抗 庆大霉素和两性霉素B之后 再加入鸡胚尿囊液培养 肉汤培养基一样变浑浊 应该不会是抗生素失效 因为都是新买的 有没有人知道可能会是什么东西污染了鸡胚尿囊液？是鸟粪样接种鸡胚之后收获的尿囊液
半拉木匠：
细菌浓度如果很高的话 抗生素是没用的
另外最好取样做一下检测或鉴别 看看到底是不是菌
conan_vs_kid：
想知道你的收获时候取出的鸡胚尿囊液是不是澄清的呢？如果这时候的鸡胚尿囊液不澄清说明已经污染，无菌检查肯定会浑浊，比如一些使鸡胚蛋白变性的东西混入你的接种样品中，会产生这样的情况，还是先检查你接种鸡胚里的样品的无菌试验是否合格，在判定吧
gcw1234：
不知道你收获的时候是怎么收获得，通常使用吸管压着里面组织慢慢的吸，没有污染啊，在无菌超净工作台内，用碘酒、酒精消毒，敲碎蛋壳，全程保证无菌，收获完之后用滤纸过滤之后检查是否有污染。
yukingboy：
看来是染菌的浓度太高了 抗生素已经不起作用了 我已经用细菌和真菌的鉴定引物P过 细菌的有条带 正在做克隆测个序看下到底是什么 yukingboy：
3# conan_vs_kid
收获尿囊液的时候死亡的鸡胚已经不是澄清的了 都挺混的你的意思是说我先检查一下需要接种的粪样处理过后是否无菌么？
yukingboy：4# gcw1234
大部分鸡胚都是正常无污染的可是有几个是死的 又检测不到病毒的存在 所以老板让我找出导致鸡胚死亡的原因 我的操作和你说的一样 你每次收获尿囊液都是过滤之后才冻存起来的么？
半拉木匠 ：
粪便样本是抗生素处理的还是过滤除菌的？
接种的样本本身要是有菌的话接种到SPF鸡胚里那肯定迅速富集生长，样本里的病毒都得被分解喽，并且鸡胚也有可能死亡。
如果尿囊液里有少量细菌生长，那收获后除菌过滤还有意义，要是菌量很大除菌就没必要了，因为里面基本上不会有病毒了。
找鸡胚死亡原因 就不用考虑收获了，除非你是连续收获。
最可能的原因就是接种的样本本身含有一定量的细菌
其次就是操作中引入了细菌。
再次就是接种的时候扎死了
yukingboy：
粪样是抗生素处理过后离心然后接鸡胚，我觉得可能是样品里面含有细菌或是在操作的过程中导致的感染。既然细菌会影响病毒的增殖，那被污染了的尿囊液就没有必要在过滤之后继续传代了。谢谢。
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