cao1976 发表于 2015-10-23 18:07:04

[转移帖]关于vero细胞狂犬疫苗中DNA的去除

原帖由论坛会员天涯明月刀发表于 2009-8-15 19:39 |

目前令狂犬疫苗企业头疼的问题是:DNA的去除问题

广大网友和老师有好方法吗?请不吝赐教。

cao1976 发表于 2015-10-23 18:07:35

ccgame发表于 2009-8-18 22:06

好像都没解决有人用膜过滤不过要损失抗原而且效果不是很理想不知道你们有什么方法呢

cao1976 发表于 2015-10-23 18:08:04

lianghuang1983发表于 2009-8-28 14:26 | :

层析是传统方法。但可以试试非限制性核酸内切酶(Benzonase),只不过国内企业还没人使用。国外已经用得很普遍了。

cao1976 发表于 2015-10-23 18:08:43

Rojjer发表于 2009-9-17 22:12 :

常用的DNA去除技术:
层析技术:
阴离子交换
阳离子交换
疏水层析
金属鳌合层析-Ca/Zn
凝胶过滤

其他技术:
膜过滤
离心
DNAse 处理
沉淀

硫酸鱼精蛋白沉淀
2. DNA酶

cao1976 发表于 2015-10-23 18:09:14

ppjia801027发表于 2009-9-27 14:27 | :

国外应用Benzonase去处宿主DNA的工艺只批准了流感及甲肝疫苗,安全性还有待于进一步研究,国内目前尚无批准的工艺,如果在工艺中加入Benzonase一定要申报噢,Benzonase的检测试剂盒还是很灵敏的,但据我所知,目前去处DNA效果最佳的方法就是加入Benzonase了

cao1976 发表于 2015-10-23 18:09:49

iamtaxpayer发表于 2009-11-24 13:53 |:

重组人P53腺病毒注射液,用过Benzonase,残留≤1ng/支。
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