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标题: 求助慢病毒转染的问题 [打印本页]

作者: paul 时间: 2016-3-22 17:50
标题: 求助慢病毒转染的问题
我计划做慢病毒。有些东西有点模糊。请教各位老师：
1.请公司包装的慢病毒，给的滴度10e8。请问可以转染多少细胞。主要担心不知道够不够我做动物试验的。
2.慢病毒转染好后用抗生素筛选容易培养出稳转细胞系吗，如果培养成功，是否就是无限扩增病毒载体？
3.如果2不可以，怎么扩增给我的包装好的病毒。像质粒那样转化大肠杆菌后扩增吗？
谢谢，如果有问得不对的地方，还请不吝指教。谢谢

作者: wwwkkk83 时间: 2016-3-23 09:09
1.要看感染的MOI, 如果moi=1, 10e8病毒可以感染 10e8细胞。
MOI（Multiplicity of Infection，感染复数）是指每个细胞感染的病毒数，通常MOI越高，病毒整合到染色体的数量以及目的蛋白的表达量越高。
对于分裂活跃的细胞，比如Hela、293细胞，MOI=1～3时，80%以上的细胞均表达目的基因。而对于非分裂细胞，比如原代细胞，感染效率较低。需要进行MOI梯度摸索实验，选择适合的MOI进行实验。

2慢病毒转染好后用抗生素筛选容易培养出稳转细胞系，如果培养成功，可以唐无限扩增，挑取表达适中的稳定细胞株，连续筛选并传3代后，冻存保重稳定细胞株。

3包装好的病毒是无法再扩增的。

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