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标题:
禽流感病毒A/PFV/Restock/34(H7N1)HA基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达
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作者:
樽满秋华
时间:
2015-5-24 12:16
标题:
禽流感病毒A/PFV/Restock/34(H7N1)HA基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达
原帖地址:
http://biosky.haotui.com/thread-653-1-14.html
原帖发布人:SF9cell
《中国预防兽医学报》
Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine 起止页码:294-297 2006年 28卷 3期
摘 要:经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/PFV/Restock/1/34(H7N1)1.7kbHA基因的cDNA,将其克隆到pMD18-T中并测序。在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后,亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHis,筛选到重组质粒命名为pBlueBacHisH7HA,测序正确后与线性化的杆状病毒DNA(Bac-N-Blue^TMDNA)共转染sf9昆虫细胞,挑取蓝色蚀斑,经三轮蚀斑纯化,获得数株重组杆状病毒rpBlueHisH7HA。提取重组病毒DNA,经PCR证明目的基因片段已插入到杆状病毒基因组中,血凝实验、SDS-PAGE和Western blot实验结果表明HA基因在重组杆状病毒感染的HFive细胞中获得了表达。[
李贺[1,2] 孟庆文[1] 冉多良[2] 于康震[1] 陈化兰[1] 李永强[1,2] 吴东来[1][1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001 [2]新疆农业大学动物医学院,新疆乌鲁木齐830052
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