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标题: [转移贴]求助：bac表达系统 [打印本页]

作者: virology 时间: 2015-7-7 08:45
标题: [转移贴]求助：bac表达系统
原贴由丢丢发表于 2010-7-21 23:14
http://biosky.haotui.com/thread-15722-1-7.html?jdfwkey=ni0d61

质粒构建好了经pcr鉴定没有问题~转sf9细胞为什么表达但是不分泌呢？应该考虑什么方面的问题呢？多谢各位大侠了~~~~

以下为战友回复

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一只蜗牛发表于 2010-7-22 08:39 ：找个酶，鉴定下质粒骨架有没有出问题。
把信号肽那一段测下序。
都符合预期的话，找代次早一点的细胞试试。
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lijiang.bj 发表于 2010-7-22 09:41 ：1.信号肽是否表达，最好找个抗体检测下
2.培养时间是否不够
3.检测方法是否不灵敏

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丢丢发表于 2010-7-21 23:14 ：序列都进行过测定，是没有问题的
bac系统是理论上说表达蛋白都可以吗？会不会因为蛋白的某些特性而不分泌呢？
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一只蜗牛发表于 2010-7-22 22:09 ：有可能的。所以，你裂解下细胞，看看细胞内有没有你的目的蛋白。

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iamboy 发表于 2010-7-31 11:16 ：没有信号肽怎么分泌？检查有信号肽？

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