各位早上好!我有些转染实验相关的问题,想请教一下大家!
我最近在做转染实验,用的是SF9细胞.转过两次了都没有成功!我觉得可能是质粒!我提质粒是按照英骏公司的说明书里提的,也就是加完溶液I\II\III以后,直接用异丙醇沉淀,然后用酒精洗!我想请教一下,用这种方法提出来的质粒,要再纯化吗?还是可以直接拿来做转染?
另外,我的培养基是SF-900 II SFM培养基,用的转染试剂是CELLFECTIN II REAGENT.有谁能否给我一个最佳的转染步骤呢?我都是按说明书上做的,都试了两次了也没有成功!感觉细胞还是可以的.希望能在此得到大家的意见和建议!谢谢!