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标题: [转移贴]FASTBACHTA和FASTBACHTB有什么区别 [打印本页]

作者: virology 时间: 2015-7-7 13:05
标题: [转移贴]FASTBACHTA和FASTBACHTB有什么区别
原贴由158584843 发表于 2010-8-28 08:57
http://biosky.haotui.com/thread-16687-1-7.html
我最近做了杆状病毒表达，重组出来的毒都是野毒，听说这2个载体是不一样的，我也不是很清楚，不知道有什么区别，用一样的片段连上不知道会不会都表达，我查了一下，这2个载体差一个碱基！我用的是HTA，听说又是HTB，不知道重组不出来是不是跟载体有关！请大家帮助一下！

以下是会员回复
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stare024 发表于 2010-8-28 09:59 ：重组不出来跟载体没有关系的。
pFastBacHT系列载体包括A，B，C三种，
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158584843 发表于 2010-8-28 21:58 ：我看了一下，A和B差一个碱基，就是在BAMH1那里，没看到序列是不是会发生移码，要是不发生的话，那还是耐心等待吧，我重组出来的目前都是野毒，郁闷中。。。。。。。。。。。。。

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zhangtianying 发表于 2010-8-29 11:24 ：To 3# 158584843
用bac-to-bac系统重组的效率是相当高的，基本上都可以一次成功，你重组不出来应该是感受态没做好或蓝白筛选有问题？

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158584843 发表于 2010-8-29 11:46 ：我的阳性质粒没有问题，重组出来都是野毒，我也很郁闷，别人都是一下成，我重组了2次都是没有，我也不知道是为什么了，很郁闷。。。。。
这三种载体是多克隆位点的阅读框不太一样。从第三个酶切位点BamH I 开始的。
BamH I的GGATCC的第一个G分别处于不同的三联密码位置。
不过跟重组病毒不出来没有关系，楼上可以耐心的再做一下。

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