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标题: [转移贴]E.coli DH10 Bac感受态制备 [打印本页]

作者: virology 时间: 2015-7-7 15:21
标题: [转移贴]E.coli DH10 Bac感受态制备
原帖最后由 smiletou 于 2009-8-6 09:55 编辑
http://biosky.haotui.com/thread-11196-1-7.html

大家好，我想问下：E.coli DH10 Bac感受态制备与DH5α的制备有没有区别？
自己制作的E.coli DH10感受态制备与Invitrogen Kit里面的用起来效果有没有很大的差异。

谢谢！

以下为会员回复：
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chuan1007 发表于 2009-8-6 12:45 : 首先，DH10 Bac和DH10 B是不同的东西，DH10 B和DH5α都是空的大肠杆菌。摇菌的时候用无抗性的LB即可。而DH10 Bac是DH10 B上连了杆状病毒的表达系统，是要加两种抗生素的，卡那和四环素。而在做转座的时候要加入3种抗生素，卡那，四环素和庆大。
剩下的步骤和做DH5α感受态都是一样的，和买的INVITROGEN的没有什么大的区别。我们都是自己做的，效果很好。

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stare024发表于 2009-8-9 09:42 :我们也是自己做的感受态，随用随做，很方便。
方法相同，摇菌的时间可能要稍长一点儿，

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