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标题: 转座后的白斑菌落，PCR目标条带是多大呢？？ [打印本页]

作者: virology 时间: 2015-7-8 09:32
标题: 转座后的白斑菌落，PCR目标条带是多大呢？？
本帖最后由 virology 于 2015-7-8 09:38 编辑

原贴由mengyu615发表于 2010-9-30 10:17
http://biosky.haotui.com/thread-17275-1-6.html

目前在做昆虫表达体系表达重组人-EGFR 蛋白，现在将pFast bac HTb-EGFR 转座到DH10bac中，目前出现蓝白斑，下一步准备PCR鉴定阳性转座子，想请问各位高手，PCR目标条带是多大呢？？我的EGFR大小是1857bp ，不胜感激感激啊！！！

以下是会员回复：
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stare024 发表于 2010-9-30 12:30 ：可以在美国英杰官网上搜索bac-to-bac，然后下载pdf格式的说明书看一下。
官网是：http://www.invitrogen.com
论坛里也可以下载到。
http://www.virology.com.cn/thread-4171-1-1.html
楼主看看吧，这个指导手册写的很详细。
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zxh001001发表于 2010-10-3 17:21 :如果使用的是pFast-Bac1载体的话，正确片段长度按理应该是2300bp+1857bp=4157bp

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mengyu615 发表于 2010-10-9 09:28 :谢谢查过手册以后就明白了我看手册用的是M13引物的正向引物和自己基因的反向引物的话，还要考虑到两者退火温度的差别，我蓝白斑筛选以后，白色菌落可以直接去划单线接液体菌吗,然后提病毒DNA 吗
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