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标题: 请问,DH10Bac需要每次都重新作转化么? [打印本页]

作者: virology 时间: 2015-7-8 11:18
标题: 请问,DH10Bac需要每次都重新作转化么?
原贴由亚纳尔发表于 2010-12-5 19:35
http://biosky.haotui.com/thread-18873-1-5.html

上次作的时候转化DH10Bac挑单克隆菌液PCR阳性率很高,选一个提质粒,用M13上下游引物,结合目的片断特异性的引物,验证都通过了,但,表达不成功,检测不出来
然后想重做,在以前选的那个单克隆划线的平板(大约3周之前画的线)上挑10个克隆,竟然一个阳性也没有了................
请问,每次都要重新作DH10Bac的转化么?

以下会员回复:

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stare024 发表于 2010-12-6 08:59: 板都放了3个星期了，应该不能再挑了。
你把原来挑的那个用LB在多扩几管抽一下。

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lvpeng1208 发表于 2011-3-15 01:21 :下次挑个3个克隆同时做吧，不然太浪费时间了

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yangyufeng 发表于 2011-5-18 19:05 :板要是放4度冰箱3周应该还可以，但没挑到阳性克隆就没办法了，三个平行做是一种比较明智的做法！

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