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标题: [转移贴]求助:接种病毒遇到的问题 [打印本页]

作者: cao1976    时间: 2015-7-20 11:53
标题: [转移贴]求助:接种病毒遇到的问题
原贴由nosuffer 发表于 2009-7-18 11:15
http://biosky.haotui.com/thread-10931-1-7.html

接种用材料为枯叶保存的马铃薯y病毒,用的tris-hcl ph=7.2 0.1M 含0.1%亚硫酸钠,使用缓冲液直接研磨,6000rpm短离心,收集上清,100-200目金刚砂接种叶面,但最后发现叶面没有明显症状,不知道问题在哪里,希望过来人指正,谢谢。

以下为会员回复:
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jbclinnic 发表于 2009-7-18 11:59:取接种的叶片RT-PCR看看有没有接上?

接种植物?具体株系,有的株系接种会有隐症的
接种的金刚砂太粗吧,一般400-600目,微伤口就好
接种后应该暗处理会好点吧
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wjg_1979 发表于 2009-7-18 17:09 :To 1# nosuffer
应该用新鲜,证明有毒的(完全可以保存在冰箱,但是时间太长的叶片很难接上)的叶片来接种,温度具有重要的作用,但接种技术也相当关键,主要是力度要恰当,不能太重,太重了叶片枯死,接不上,太轻又不能产生足够的创伤也不能接上.总之,不同的病毒,在接种条件上会有差别,有时会很大.
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nosuffer 发表于 2009-7-18 17:21 :谢谢两位的帮助。我是接种在花魔芋上,用了症状最好的叶片,跑了rt-pcr,带很浅,几乎不可见,不知道哪个公司有500目以上金刚砂卖?咨询了很多地方都没有。怎么上图啊,可以给2位看看图。
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dongguan发表于 2009-8-4 20:20:如果用干燥的样品来接,经常会出现接种不成功的情况。建议保存在-80或-20冰箱。原来我也是习惯用干燥的样品,后来大部分都失活了,可惜。。。。。。。。。。。。   




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