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标题: [转移贴]HBV的受体为什么不好找呢？ [打印本页]

作者: hantavirus 时间: 2015-8-20 11:18
标题: [转移贴]HBV的受体为什么不好找呢？
原贴由kinglemon 发表于 2009-6-3 08:49 ：

我是新手大牛指教阿 hehe。同样是流行病毒 HIV的受体10年前就清楚了 HCV的受体看来很复杂不过也成功找到了（4个蛋白？）为什么HBV的受体进展很小呢？这么多年下来只找到一些似是而非的binding protein 没有一个能够成功的把非肝源细胞系变成HBV易感的甚至这些binding protein的重要性也很值得怀疑...（唯一一个号称能够使大鼠肝细胞系成为HBV易感的是Annexin V 不过没看到什么后续工作）

大家说说到底是什么原因或者困难呢？

我很想知道有没有Lab系统性的做过cDNA library(用人肝细胞library) screen找HBV的receptor 按说要想找receptor这是个很明显的办法但是我没查到过这样的paper

作者: hantavirus 时间: 2015-8-20 12:11
bigben发表于 2009-6-3 13:02：

好话题
确实是个谜

贴上图，把HBV膜蛋白，以及和preS1，preS2，S蛋白相互作用的蛋白总结一下
来自Glebe, D. and S. Urban, Viral and cellular determinants involved in hepadnaviral entry. World J Gastroenterol, 2007. 13(1): p. 22-38.
http://www.wjgnet.com/1007-9327/13/22.pdf

作者: hantavirus 时间: 2015-8-20 16:36
kinglemon 发表于 2009-6-3 13:25 ：

To bigben

谢谢。我大概看了一些这方面的paper 感觉主要是用生化方法找到的binding protein （in vitro binding或者是表达在细胞表面然后做binding assay）感觉这不是找receptor的正确思路啊 (binding并不意味着能帮助entry 而且这么找的binding protein假阳性肯定很高) 所以我才很好奇为什么没有人做个好点的screen 很怀疑是不是有人做了但是做不出来或者发表了但是我没看到来这里问问大牛们 hehe

作者: hantavirus 时间: 2015-8-20 16:39
bigben 发表于 2009-6-3 14:17：

是的，不少是用pull down得出来的
可能因为和HBV同源的DHBV的俩受体就是用类似方法找出来的吧：glycine decarboxylase和Carboxypeptidase D，不过关于这俩个受体还没有最终确认，后面一个好像得到普遍承认
我也觉得奇怪，为什么没有人把上面列的一堆蛋白系统性的比较一下，排除掉假阳性的
关于HBV，有说发现低亲和力的受体：glycosaminoglycan
Leistner, C.M., S. Gruen-Bernhard, and D. Glebe, Role of glycosaminoglycans for binding and infection of hepatitis B virus. Cell Microbiol, 2008. 10(1): p. 122-33.
现在普遍认为是超过一个受体蛋白介导吸附，融合
对于HBV，有一个问题是，没有合适的细胞系
有细胞系HepG2，Huh7支持HBV的复制，但是前期阶段不知到限制在哪里：或许细胞系上受体都没有问题，处在融合这一阶段，或者出在把rcDNA释放到核内这一阶段。。。

作者: hantavirus 时间: 2015-8-20 16:40
kinglemon 发表于 2009-6-3 14:33 ：

To 楼上的大奔
你说的有道理。。如果HBV从进入细胞到开始转录/复制都需要比较特殊的蛋白（比如说只有原代肝细胞才有而HepG2都可能少很多比如entry+进核）那在cell ine里面做screen能找到相关蛋白就太难了（得这n个基因同时转染一个细胞才行）。。。

作者: hantavirus 时间: 2015-8-20 16:42
biotcm 发表于 2009-6-3 14:53 ：

把rcDNA释放到核内这一阶段。。。

这个可以排除的

作者: hantavirus 时间: 2015-8-20 16:42
bigben 发表于 2009-6-3 18:03 ：

To biotcm

我也是印象中记得，原来出处记不得了

不过我在Melegari, M., S.K. Wolf, and R.J. Schneider, Hepatitis B virus DNA replication is coordinated by core protein serine phosphorylation and HBx expression. J Virol, 2005. 79(15): p. 9810-20.讨论里面看到一句话：
“In transfected HepG2 cells, viral nucleoparticle recycling does not occur at a significant level, since there is little or no formation of cccDNA.”

In transfected HepG2 cells, viral nucleoparticle recycling does not occur at a significant level也许提示在细胞系里面可能有困难，但是是不是决定性的，就不知道了

关于这个话题脱壳释放基因组入核，有一篇文章：
Rabe, B., et al. , Nuclear import of hepatitis B virus capsids and release of the viral genome. Proc Natl Acad Sci U S A, 2003. 100(17): p. 9849-54.

但是我不知道这篇文章告诉了我什么：）都是具体蛋白之间的相互作用，也没在讨论中讨论什么现象

但说回来，我觉得最大的限制可能在融合这一阶段

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