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方法三：
1、试验前一天用2 ×105HEP22 细胞接种24 孔板。37 ℃,5 % CO2 培育过夜。Hanks 液冲洗细胞1～2 次,用NaHCO3 调Eagle MEM的pH 值后稀释RSV(10 倍稀释) ,然后加入24 孔板中(设2个复孔) ,吸附1～2 h ,15～30 min 摇动一次以保证
蚀斑分布均匀。
2、以2 倍的Eagle 内加青链霉素、卡那霉素、碳酸氢钠、琼脂糖配成琼脂覆盖层。
3、倒出病毒液,加入琼脂覆盖层0.5 ml ,冷凝后,倒置于34 ℃,5d 后,用福尔马林固定,015 %结晶紫染色。显微镜下数斑。
4、PFU = a1b/ v ( PFU 指每ml 病毒样品空斑形成单位,a 指空斑均数,b 指病毒稀释度的倒数,v 指病毒量。
参考文献：邹毅，黄海鹭，徐军，钟南山；小鼠的原发性呼吸道合胞病毒感染；中华结核和呼吸杂志2001 年8 月第24 卷第8 期。