求助关于慢病毒的储存与稀释

paul

在网上查到资料：
1、病毒的储存：用户收到病毒液后在很短时间内即使用慢病毒进行实验，可以将病毒暂时放置于4 ℃保存；如需长期保存请放置于-80℃（病毒置于冻存管，并使用封口膜封口）。
A． 病毒可以存放于-80℃ 6个月以上；但如果病毒储存时间超过6个月，我们建议在使用前需要重新滴定病毒滴度。
B． 反复冻融会降低病毒滴度：每次冻融会降低病毒滴度10%；因此在病毒使用过程中应仅尽量避免反复冻融，为避免反复冻融我们强烈建议客户收到病毒后按照每次的使用量进行分装。
2、 病毒的稀释：用户需要稀释病毒时，请将病毒取出置于冰浴融解后，使用培养目的细胞用PBS或无血清培养基(含血清或含双抗不影响病毒感染)混匀分装后4℃保存(请尽量在三天内用完) 分装后使用。

试验计划：分别在48h和72h收集病毒上清，然后将病毒液混合后离心过滤。
问题：
1、48h收集的病毒应该储存在4°C还是-80°C？请教各位是怎么做的？
2、4°C保存会对病毒造成什么样的影响？
3、4°C和-80°C保存，哪种对病毒的影响大？

paul

我想把48小时收集的病毒液不做任何处理，放在4°C；放一天，等收集到72h的病毒时，混合到一起后，再离心去细胞碎片，然后用0.45um的过滤器过滤，然后再分装冻存于-80°C冰箱。这样可以吗？

wwwkkk83

paul 发表于 2016-3-22 17:15
我想把48小时收集的病毒液不做任何处理，放在4°C；放一天，等收集到72h的病毒时，混合到一起后，再离心去 ...

可以！

1、慢病毒的储存

用户收到病毒液后在短期内即使用慢病毒进行实验，可以将病毒暂时放置于4 ℃保存（尽量一周内用完）；如需长期保存请放置于-80℃。

注：

a．反复冻融会降低病毒滴度（每次冻融会降低病毒滴度10%）；在病毒使用过程中应尽量避免反复冻融，所以我们前期对病毒进行了分装（100ul/tube），收到后直接放置-80℃保存即可。

b．如果病毒储存时间超过6个月，我们建议使用前重新测定病毒滴度。

2、慢病毒的稀释

用户需要稀释病毒时，请将病毒取出置于冰浴融解后，使用培养目的细胞用PBS或无血清培养基(含血清或含双抗不影响病毒感染)混匀分装后置于4℃保存(请尽量一周内用完)。

ipsvirus

1. 48h收集的病毒放4度，再跟72h的病毒液混合
2. 4度在短期内（一周内）对病毒影响不大
3. 病毒在一周内使用可以直接放4度保存了。-80度时长期保存，但不要反复冻融，所以要分装保存。