师兄有话说：动物实验替代方法在疫苗研发中的应用

Vaccine

      动物实验可以说是我等从事病毒学研究者 耳熟而详的工作，类似于现在的分子生物研究。真的是，发篇SCI，没有分子生物学数据，没有动物实验数据，见面都不好意思和人打招呼。动物试验可以说广泛应用于自然科学领域，每年，全球因此而献身的小鼠，大鼠，豚鼠，金黄地鼠，新西兰大白兔等不计其数，即使我们的近亲，猴子也难逃为科学而献身的洗礼。
       由此，在1959年英国科学家William和Rex就提出了3R原则。该原则也是现今动物试验替代方法的发展方向，所以说你如果还不知道3R原则，可以肯定的说，你还没有带过学生，还没有当过师兄或师姐，或者你可能就是整天DOATA或魔兽的也能毕业的那类青年才俊。为了师弟师妹的将来，下面简单科普下动物实验替代方法，

1、推进动物实验替代的机构组织
         目前，许多国家都制定了法规或发布管理条例、行业规范予以约束动物试验。对于替代方法研究的有三个组织比较出名，一是美国机构间替代方法验证协调委员会( Interagency Coordinating Committee on the Validation of Alternative Methods， ICCVAM)；二是欧盟的欧洲替代方法验证中心( European centre for the validation of alternative methods，ECVAM)；三是日本替代方法验证中心( Japanese Centre for the Validation of Alternative Methods，JaCVAM) 。其中ECVAM后者目前比较活跃，定期组织全球的研讨会。

2、在疫苗领域，动物试验替代方面的进展
      ECVAM 完成验证的并获认可并颁布试验指南的替代方法主要涉及急性毒性试验、局部毒性试验、发育毒性试验、遗传毒性试验4 个领域。随着人类对毒性评估经验的逐步丰富，目前美国、英国、日本相继废除原有严格的LD50方法，改用3 种替代方法: 急性毒性分类法、固定计量法和上下法。固定计量法的优势是不以死亡为观察终点，动物数的使用只有传统LD50方法的61%，缺陷是与LD50方法比较，仍有约20%的结果无法匹配; 上下法的优势是动物数量极少，仅5 只，且效能与固定计量法接近，缺陷是仍以死亡为观察终点，且比较耗时。大小鼠致畸试验是目前发育毒性测试中使用最多的方法，替代方法中仅胚胎毒性的胚胎干细胞试验( Embryonic stem cell test，EST)纳入OECD 草案43，EST 具有高通量检测和评价的特点。遗传毒性试验中替代体外染色体畸变检测的体外微核试验于2009 年已被OECD 接受并形成指南487。

       目前ECVAM正在开展的一项替代研究是狂犬病疫苗效价测定项目的替代，狂犬病疫苗效价测定目前经典的方法为NIH法，或者说小鼠法，还有在疫苗生产过程病毒收获液病毒的滴定等也需要小鼠。每年疫苗企业及检验机构所用的小鼠约20万只，而且动物实验方法变异系数一般在25%-400%之间。因此的确需要加大替代方法研究。其替代原理就是采用检测疫苗中的糖蛋白抗原含量以代替效价测定，采用细胞荧光法代替小鼠法的病毒滴定。

       总之，替代方法的应用领域虽相当广泛，但仍需谨慎扩大。对于关系到人类健康和生命安全的实验，如人类疾病模型的实验，关键的药效学实验和新药安全评价中中药的毒理学实验等，实验动物仍是最客观、科学、参考意义最大的观察对象。从替代方法在国外的发展历史来看，欧盟的替代方法主要用于化妆品，因为化妆品人用量有限，其健康风险可以控制在有限范围。在药品、生物制品、化学品、农药等行业，替代方法的研究与推广步伐明显缓慢。  


        所以我其实说了半天，似乎啥也没有！ 其实这就是一个师兄应该具有的特质。

Vaccine

不是，我说了这么多，快吃饭了，师妹陪哥打会DOTA呗？

师妹： 不好意思，我得去传细胞了哦

那不打了，咱们去吃水煮鱼吧？

师妹： 真的，你请客，说话算数，那现在就走吧~~~~

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cloudwin

多来说说话。。

晚风hit

我来说一个~自己也做过的

可以用免疫蛋鸡的鸡蛋中的多克隆卵黄抗体（IgY）代替免疫小鼠或兔子血清中的多克隆抗体(IgG)。
与本文相关的优点是：避免了动物流血，有助于动物福利。

与本文无关的优点：
1、免疫蛋鸡后可以持续采蛋，而且每媚免疫蛋中的抗体数量达到80~150mg，其中特异性抗体达到1%~10%.
2、蛋鸡与哺乳动物亲缘关系远，一些哺乳动物保守抗原更容易在蛋鸡中产生高效价抗体。
3、与人体的人类抗鼠抗体没有交叉反应，无IgG普遍存在的补体反应，与人类风湿因子无交叉反应，与蛋白A、蛋白G无亲和性。（这一点有利于在免疫检测中减少假阳性的出现）