转移贴-关于流感细胞培养TPCK-胰酶浓度

rojjer · 发表于 2015-11-2 11:26:01

原帖由hwqstrong 发表于 25/9/2010 13:30

弱弱的问一下，在配TPCK胰酶母液时，用的是什么溶剂啊？去离子水or PBS

rojjer · 发表于 2015-11-2 11:26:22

半拉木匠：
1# hwqstrong
按道理应该都似乎PBS

rojjer · 发表于 2015-11-2 11:26:41

Rojjer：
这个影响不大吧，这里去离子水和PBS两者的区别在于去离子水是低渗液体，可能会把细胞裂解了，但是我们一般配置的TPCK-Trypsin母液的到工作浓度时需要用PBS或者DMEM稀释的倍数还是比较大的（我的需要稀释200倍）。此时去离子水影响已经不大了，当然用PBS就没有这个顾虑了。

rojjer · 发表于 2015-11-2 11:27:43

mingming0596：
是啊没什么太大的区别

hwqstrong ：
好。谢谢大家！

leceline：
3# Rojjer
请教Rojjer,你的TPCK-Trypsin工作浓度是多大？有没有添加BSA或者牛血清？多大浓度？
我用的2ug/mlTPCK-Trypsin,没添加时细胞都圆缩了，耐受不了.
谢谢

rojjer · 发表于 2015-11-2 11:28:05

Rojjer：
6# leceline

我们实验室用的是终浓度5ug/ml的TPCK-Trypsin。（母液稀释200倍）
其实查文献就知道从0.25ug/ml到10μg/ml甚至40 μg/ml都有人做过。
一般情况下用2ug/ml较多。
可能是实验室习惯，大家都这样传下来的，我们用的都是5ug/ml，没有加血清或BSA。呵呵

ghx0123 · 发表于 2015-11-2 12:38:13

TPCK-Trypsin的说明书你们都看过吗？我看过它的说明书怎么都没看懂啊，说是母液用甲醇配制储存更好。到底是怎么回事啊，你们对流感疫苗细胞培养研究的深吗？给点意见呗

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