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关于PCR和引物设计的几个困惑

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发表于 2016-7-15 11:59:16 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
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沙发
发表于 2016-7-15 15:39:48 | 只看该作者
你是做什么PCR?普通的扩增鉴定,还是realtime PCR?
不过从你的问题来看好像是扩增鉴定,
1.通用引物是一方面,保守区一般不会发生突变,对于扩增一些病毒的高变基因,如流感HA来说,这样设计引物就可以避免人为覆盖掉突变区域,甚至因突变导致的不能扩增等。
2.SNP是单个核苷酸突变,对于引物来说没有关系,能扩增出来,但是就像在1中说的,你设计的引物会人为覆盖掉突变区域,扩增出来的都是你的引物上的核苷酸。
3.基因组DNA的PCR应该也没有什么特别的地方吧,我也没做过,做的都是cDNA。基因组大,可能对你的引物特异性要求更高。

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 楼主| 发表于 2016-7-15 16:47:42 | 只看该作者
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发表于 2016-8-16 12:22:25 | 只看该作者
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