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鲑鱼精DNA配置SOP

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发表于 2016-8-31 17:51:28 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
1. 称取鲑鱼精DNA 2 g置于500 ml烧杯中,加入约200 ml的TE Buffer。
2. 用磁力搅拌器室温搅拌2~4小时,溶解后加入4 ml的5 M NaCl,使其终浓度为0.1 M。
3. 使用氯仿抽提两次。加大约2倍体积,取上面冻状物。
4. 回收水相溶液后,使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20次,以切断DNA。
5. 加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀。
6. 离心回收DNA后,溶解于100 ml的去离子水中,测定溶液的OD260值。
7. 计算溶液的DNA浓度后,稀释DNA溶液至10 mg/ml。
8. 煮沸10分钟后,分装成小份(1 ml/份)。-20℃保存。
9. 使用前在沸水浴中加热5分钟后,迅速冰浴冷却。
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