中国病毒学论坛|我们一直在坚持!

标题: [转移贴]犬瘟热病毒纯化 [打印本页]

作者: hantavirus    时间: 2015-8-5 12:12
标题: [转移贴]犬瘟热病毒纯化
原贴由wangxj06发表于 2010-7-20 13:40

我想请教一下大家,使用密度梯度离心法纯化犬瘟热病毒时,用多大的离心力,具体如何进行呢?
作者: hantavirus    时间: 2015-8-5 12:13
sdauvet 发表于 2010-9-27 20:09:

一、先以4500rpm将细胞培养物离心15min,弃沉淀,接着向上清液中加1/4体积氯仿,充分混匀后,置4 ℃1h后,5000rpm离心20 min,取上清。
二、然后用冷冻真空浓缩水相到1/10。将该浓缩液做30%~60%不连续蔗糖密度梯度离心。
在离心管中依次加入30%、45%、60%的蔗糖,最后加0.5mL浓缩的含病毒样品,在冷冻
超速离心机中,于4℃下以20000rpm,离心3h。然后用灭菌注射器取出各组带。




欢迎光临 中国病毒学论坛|我们一直在坚持! (http://bbs.virology.com.cn/) Powered by Discuz! X3.2