本帖转自:http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者:walkundersky: Y9 o+ p$ K8 k0 M: b
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来,经过不断的开发和改进,现在已经广泛应用在诸多领域,是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
1 m3 d( p: _! `: [1 h$ F 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer:A Laboratory Manual第二版的影印本,是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿,是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进,从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧,无所不至,令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。' F- @8 W5 f3 c
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇,可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考,既是实验室必备的工具书,也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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目录
2 w6 s& d$ A3 a0 h' b: [0 W3 q0 k& H第1篇 PCR导论
( z3 | R% g$ z: E1 建立一个PCR实验室& S7 s' y6 Y/ |! T9 r
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略/ f U! s" f. [6 E3 i0 h5 d% A
3 高保真PCR酶1 o% j( @+ C( ^# G
4 PCR的最优化和常见问题解析
6 k8 u0 _# T9 v7 r' q- K5 j% Z5 富含GC片段的PCR扩增
7 i5 [6 } t; y" ]1 r6 精确扩增大片段的技巧$ |0 i# M0 ~1 `! B
7 PCR引物设计5 U3 _0 E6 l$ z6 Z
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序% K7 Z# R9 |7 a, B" j, I
第2篇 样品的制备9 {$ }" [% A3 L y6 i d
9 DNA的纯化
. c+ ?# R) [4 C10 RNA的纯化$ U2 J2 v+ S3 J' B
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达& K# J+ _3 v9 J o4 s" m
12 克服PCR受抑制的策略
1 \; u) `5 |$ E1 a, G2 Y第3篇 RT-PCR方法2 y8 Y7 a( ~5 X$ ]% L
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用7 s# W% {3 i- ?0 E/ d/ p" ?* u
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler# _; |( @: l% J5 K5 w
15 定量PCR的新技术; X4 M! e- X- W% j
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
' A. z8 R$ T+ w3 u7 C第4篇 PCR产物的检测:专门应用/ u/ P# }! C& I4 M" [
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
; z8 k8 C! S( o) R9 Q* L18 单链构象多态性分析
" g! \0 j4 r) [2 x19 逆转录酶原位PCR
8 W$ q9 ] F+ x; D7 s- l+ G20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法! x4 d9 R2 U* o4 z
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
1 t$ N7 B; B& {3 j# d6 o21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
( u; y1 n! V4 ]" `/ N22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
- C, k" A( @+ x; L2 c23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
' b1 d7 R4 N: e* u; k第6篇 用PCR进行克隆
+ G2 W; B; {; ^! g# }24 以PCR为基础的文库筛选方法
" Z1 i& N* s7 n& d25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
7 y( ~0 O: Q) R8 |; X7 }26 用PCR合成和分析DNA文库" G! d- O) F5 Q {* ~' h g
第7篇 PCR产物的克隆# N- V, E6 T |6 D6 S7 E
27 克隆PCR产物的策略7 v& I' n; d& m7 G' p9 n( ~
28 PCR产物双向和定向克隆
9 e8 b+ @3 X B' F+ t" c5 N+ g [29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
6 w; j/ f/ _# W& V0 z5 _* q第8篇 利用PCR进行诱变
, R% U1 @+ s5 \# Q0 j# j2 T30 诱变PCR% z* {* a3 X h/ X6 r: h
31 快速PCR定点突变
2 c- y; W* e* H: @& k: B32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
3 F {7 m, n& n2 W33 流线型基因装配PCR7 o1 i$ Y; Y1 R6 ?. K
附录1 专利
; p$ t7 h6 N1 P1 l/ O1 ]% [6 l: [附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
7 x( A# ?% c: l" b9 }( h7 ]/ {附录3 注意事项
# ~. R" _, F6 H! ^/ I附录4 供应商
3 L" _1 i7 w. [3 O6 v- B索引
1 {$ e( m7 {1 D7 X% W" V) l# C
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2 B3 l/ P+ M2 P7 A下载地址:( J6 D9 z* I* _7 X/ h
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