随着现代临床学不断发展,ELISA法比较灵敏,不需特殊设备,可以定性分析,所以应用发展迅速。ELISA手工法已成为领域的现实。但在实际工作中,可能会因操作不当而出现一些异常指标。近几年来笔者在免疫室工作中获得一些经验和体会,现介绍如下: (1)待检血清应新鲜或冰冻保存,不能污染,否则可出现非特异性反应;较严重溶血,标本易出现假阳性。 (2)在温育时,反应板有时受到异常剧烈的震动,致使有的阳性标本板孔中的液体溅入阴性板孔中,尽管马上洗板,还会造成部分阴性标本的假阳性。原因可能是有时阳性标本浓度太高,种特异性反应比较迅速,一旦失手发生此情况,建议重做。 (3)洗板时:①洗板不彻底,未除去实验中没参与反应的酶类物质,造成HBsAg、HBsAb和HBeAg的假阳性;或HBeAb和HBcAb的假阴性。②加注洗涤液时冲力过大;将包被在固相载体表面的成分脱落导致HBsAg、HBsAb、HBeAg假阴性;或HBeAb和HBcAb的假阳性。 (4)有时我们在加样过程中,常常会遇到别标本未离心等情况,为了节约时间,往往这时我们会先加酶结合物,然后等标本分离好后再加标本,殊不知,这样,竟常常会造成HBeAb和HBcAb的假阴性。因为HBeAb和HBcAb都是竞争抑制法,先加入酶标记的抗体,首先与固相载体上的抗原结合,待加入显色剂后,因酶的存在而显色,故呈阴性。 总之,一点小小的疏忽、失误可能造成检验结果的相悖,给及家属带来物质精神上的损失,给临床确诊带来麻烦。因此,作为检验工作人员,工作中要尽量减少失误,严格遵守操作规程,并及时总结经验,提高我们的检验工作水平,为临床提供可靠的诊断依据。
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