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转移贴:关于血凝和TCID50?

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发表于 2015-10-22 22:52:13 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
原帖由leceline 发表于23/8/2010 18:12
H1N1
今天测了一下鸡胚尿囊液的效价,终点在稀释1280时。
同时测了一下96-well plate mdck感染不同浓度HINI第三天的上清,差异有点显著(因为TPCK-TRYPSIN 浓度不一样)。无胰酶组算出来LogTCID50=-3.5,而0.5ug/ml胰酶组目测了一下是-5.几(具体没算),更奇怪的是胰酶1ug/ml和2ug/ml组的阴性对照(-virus+TPCK-Typsin)都有凝集(淡淡的一个环,同板有明显的环状孔),同时我也设了-virus-TPCK-Tryppsin组,无凝集产生。

问题1:测出来的1280怎么跟Reed-Munch方法里的TICD50换算?
    2:这两种判断效价的方法看来差异挺大,什么情况用哪种呢?
    3:胰酶的有无真的对virus infection影响很大,我们测TCID50时到底要不要加呢?
    4:阴性对照怎么会有凝集产生呢?是否跟溶血有关?今天采的血貌似有点溶血,但是测鸡胚尿囊液时阴性对照是完全不凝的。

请高手点拨一下,万分谢谢!
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 楼主| 发表于 2015-10-22 22:52:36 | 只看该作者
hwqstrong 回复:
红细胞凝集试验是没法和TCID50换算的,这是两种测定流感病毒的方法。在没有胰酶的情况下低致病性的流感病毒的HA吸附到细胞上时不能裂解成HA1和HA2也就是不能感染复制,所以胰酶是要加的。要不然不会感染,当然向高致病性的H5N1自己就能裂解。

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 楼主| 发表于 2015-10-22 22:53:01 | 只看该作者
wangfei2002523 回复:
流感病毒离子表面的HA是未裂解的吗?
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