我的HBV DNA去哪了？

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来源：检验视界网 　　作者：承德医学院附属医院检验科 邱伟
【案例经过】

这件事发生在笔者实习期间，那是笔者轮转到PCR室实习的第二个周末。上午八点带教老师和我准时投入到自己的战斗当中，一切都有条不紊的进行着，临近下班之时，李老师把我叫过去了。

“小邱，你过来一下，你看看这个结果”

笔者坐下来仔细查看着这位患者的各种信息：患者男，年龄8个月，诊断肝炎，前天入院治疗，乙肝五项结果HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性，大三阳，其他指标大致正常。可是一看今天PCR结果却是HBV DNA<1×10^3（PCR-荧光探针法，上海科华）。

“王老师，这样的结果应该不可能呀，这个孩子是大三阳，怎么PCR会是阴性的呢？”

“是呀，虽然HBeAg阳性的乙肝患者，HBV DNA的阳性率是95%左右，可是出现那5%阴性的时候实在是很少，我都没见过”看看标本没有溶血、脂血，今天的质控线也很完美。难道是乙肝五项结果有问题？患者真的是HBeAg阳性么？还是患者抗病毒治疗后HBV DNA转阴了？

立刻复查原血乙肝五项（电化学发光法，罗氏601），1h后免疫室回报复查结果依然为大三阳，难道是今天的PCR检测出问题了？王老师亲自找到这个患者的标本核对所有信息无误后，复查PCR。中午结果出来了，可出现在眼前的仍然是一天躺着的平直的扩增曲线。

无计可施之时，王老师让我去病房看看护士采血有没有问题，到了感染科病房，见到患者家属说明来意后，家属情绪很激动。

“孩子这么小，你们早上刚抽完两管，扎了好几针，怎么现在又要抽啊，你们抽血的技术怎么这么差呀”

“您好，这孩子小血管不好找，实在不好意思，您说早上护士抽了两管？”“是呀，一管绿的，一管粉的，粉的抽的时候孩子都哭过去了”

难道是？一种不祥的预感油然而生，按捺住心中的疑惑。又和家属解释半天终于同意，抽血后直接找到了今天早上的责任护士小李。小李是今年刚毕业进科不久的护士，追问了半天，她终于道出了实情。“因为那个小孩血管不好找，扎了两针绿管的够了，粉管的不够，要扎第三针家属急了，态度很不好还骂了我，但是粉色的又太少，我就把绿管的血倒到粉管里了，实在对不起，我也不知道影响会这么大。”

回到检验科马上复查新采的EDTA抗凝的标本，下午结果出来了，HBV DNA为6.5×10^7。终于水落石出，这个谜团的出现原来是护士抽错标本管导致的结果。

【分析与心得】

平时我科检测HBV DNA所用的为EDTA的抗凝管，因为肝素对HBV DNA荧光定量检测结果会产生影响。据文献报道是肝素抑制了Taq 酶的活性, 干扰了HBV DNA的合成，从而会使检测结果出现假阴性[1]。

检验质量涉及了标本分析前、中、后的每个环节，而分析前质量则是构成临床检验质量保证的第一个重要环节，而在实验误差中，分析前因素占71%；临床反馈不满意的检验结果，有80%的报告可最终溯源到标本不符合要求[2]。我们有时会碰到血糖30mmol/L,血钾11mmol/L等等，这些大部分都是临床工作中因分析前标本质量涉及的环节因素多、控制方法不得力等原因造成的。分析前质量不合格不仅增加了医护人员的工作量，还造成了时间和资源的浪费，造成患者第二次抽血，有时更会引起患者的不满和纠纷。所以作为一名临床护理人员，应该从思想上充分认识到分析前血标本质量控制的重要性，充分认识到护理人员在质量控制中的重要作用，自觉做好每一个环节质量的自控和他控，切实保证分析前血标本的质量。作为检验人员也要走出检验科，加强与临床的配合与沟通，对护理人员发放学习资料，并现场培训进行有效沟通，对不合格标本，耐心细致的做好临床护士、医生的解释工作，定期沟通并反馈意见从而更好进行全面的质量管理。检验人员在工作之余更要学好专业基础知识，加强临床知识与临床思维的学习，从而更好地预防和发现分析前失误所造成的误差，在检验工作中对质量控制的每个环节严格把关，减少误差，努力提高检验数据的可靠性和准确性，更好的为患者服务。

参考文献：

[1] Yokota M, TatsumiN, Nothalang O, etal. Effects ofheparin on polymer asechain reaction for blood whitecells[ J] . J Clin Lab Anal, 1999, 13: 133—140。

[2] 丛玉隆. 临床实验室分析前质量管理及对策[J]. 中华检验医学杂志, 2004, 27(8): 483-487