293和293T细胞

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293和293T
组织来源： 293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高，转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外（分泌的或膜）蛋白的便捷方式。
形态特点 上皮细胞
致瘤性 +
产物或抗原 大T抗原
染色体核型 亚三倍体人细胞系。染色体众数为64，30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der(1)t(1;15) (q42;q13), der(19)t(3;19) (q12;q13), der(12)t(8;12) (q22;p13),还有四条标记染色体，有的细胞另有5条标记染色体。der(1)与M8 (or Xq+)常常成对出现。N17 与 N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体，两条Xq+，一条Xp+。
生长特性 粘附
文献评价 293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞。
表达转染的腺病毒5的基因。
早期报道认为此细胞含有Ad 5基因组左端和右端[RF32764]，现已清楚仅含有左端序列
此细胞系人腺病毒滴度高。
室温不贴壁，37℃几日后重新贴壁。
表达由整合素beta-1 亚基与玻基结合素受体 alpha-v 亚基组成的玻基结合素细胞表面受体.
传代 293:弃培养基，含0.25% 胰酶, 0.03% EDTA 消化液洗涤，弃去，加1-2ml消化液室温或37℃消化。
加入新鲜培养基，吸出，分到新培养皿中。一传二至一传四。
293T:生长快，通常倍增时间不到一天 。每3~4 天1：10至1：20稀释，5% CO2条件下培养。细胞贴壁疏松，可只用EDTA消化，不要用胰蛋白酶过度消化。

培养基更换 每2-3天一次
冻存液 95%培养基；5%,DMSO；culture medium 95%; DMSO, 5%；
培养条件 ATCC培养基：90%的MEM Eagle，加入2mM L-谷氨酰胺，1.5g/L碳酸氢钠，0.1 mM必需氨基酸，1.0 mM 丙酮酸钠；10%加热灭活的马血清
37℃培养

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The 293FT Cell Line is derived from the 293F Cell Line and stably
expresses the SV40 large T antigen from the pCMVSPORT6TAg.neo plasmid.
Expression of the SV40 large T antigen is controlled by the human cytomegalovirus
(CMV) promoter and is high-level and constitutive. Studies have demonstrated maximal virus production in human 293 cells expressing SV40 large T antigen (Naldini et al., 1996), making the 293FT Cell Line a particularly suitable host for generating lentiviral constructs using the ViraPower Lentiviral Expression System available from Invitrogen.
The 293 Cell Line is a permanent line established from primary embryonal human
kidney transformed with sheared human adenovirus type 5 DNA (Graham et al.,
1977; Harrison et al., 1977). The E1A adenovirus gene is expressed in these cells
and participates in transactivation of some viral promoters, allowing these cells to
produce very high levels of protein.
The 293-F Cell Line available from Invitrogen (Catalog no. 11625) is a fastgrowing
variant of the 293 cell line, and was originally obtained from Robert Horlick at Pharmacopeia.

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如果要使用 ViraPower™ 慢病毒表达系统产生高滴度的慢病毒，293FT 细胞系是理想的选择。293FT 细胞系是生长快速，非常易于转染的克隆分离物，来自通过 SV40 大 T 抗原转化的人胚胎肾细胞。 ViraPower™ 表达载体和 ViraPower™ 慢病毒包装混合物 (ViraPower™ Lentiviral Packaging Mix) 共转染进 293FT 细胞中时，可形成高水平的病毒 RNA 及包装所需的 gag/pol 和 rev 蛋白。

优势
• 增长迅速
• 高效转染
• 高病毒滴度
• 极高的蛋白表达水平

重要特性
• 来源于SV40大T抗原转化的人胚肾细胞，是具有高度可转然性的克隆分离产物。存在SV40大T抗原蛋白能从含SV40起点的载体上进行非常高水平的表达。实际上它比以往使用的293细胞或T抗原转化的COS细胞表达水平更高。

Kit includes
• 293FT细胞系冻存在1ml装90%的完全培养基和10%的二甲基亚砜中。

仅限科研使用。不可用于人或动物的诊断或治疗。

https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/R70007

病毒云

感谢楼主分享，先收藏了。

cloudwin

非常有用。。谢谢。。