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293细胞培养心得 【ZT】

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发表于 2017-3-27 16:54:05 | 显示全部楼层 |阅读模式
转自丁香园,作者SyCellCulture

接触293也有半年了,从开始的养不活到现在的成熟,我也蜕变了。   293,贴壁不牢,换液,pbs洗不能有太大的动作,我感觉这个细胞不怕挤,但是密度太小的话长的就很慢。
好吧,第一次总结,语言组织的太烂,别介意,学经验就好。
复苏:正常复苏,跟其他细胞一样,简单的就不说了,离心之后看细胞量,根据细胞量铺板子(这里我用的是6wp,本人不喜欢用瓶,实验需要大量的细胞直接用大皿)293细胞稍小一些,找好感觉。(一般冻存是2/6或3/6冻一管,复苏就放2/6就行),以2/6为例:刚复苏的293状态特别不好,一团一团的,一副要死的样子,不用担心,每天看一下,长满再传!如果细胞团太大的话细胞量还是不太多就单传就是2/6传2/6,一定等长满再传。
传代:刚来的时候用的是MEM培养基,天性吧,我太懒了,养了好几种细胞都是DMEM(10%FBS),然后293夜跟着用DMEM了(感觉没啥变化)也是直接捞干的来!什么吸弃培养基pbs洗都差不多,就是温柔点。重要的是消化,6wp每孔0.5ml胰酶,(正常的胰酶就行,没太大要求),轻轻晃匀,让细胞都沾上胰酶,然后直接吸出来(贴壁不牢不用等时间,否则细胞都脱落了就该离心了。。懒病)静置10~30s,培养基重悬1:2传代,吹匀,铺板。
  也尝试过不用胰酶消化,也可以,就是感觉吹不太开,细胞有聚团的,太用力对细胞伤害太大了。。

1:2传代,第二天就不用动,隔一天一传,也比较好掌握时间。感觉就刚复苏时娇气点长起来就容易养了,希望大家用心对待细胞,养细胞就像养孩子一样,该温柔就温柔,不听话也别惯着!掌握好度,不要被细胞牵着鼻子走,你才是他的daddy!

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 楼主| 发表于 2017-3-27 16:55:04 | 显示全部楼层
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发表于 2017-3-27 17:00:57 | 显示全部楼层
好喜欢这句:养细胞就像养孩子一样,该温柔就温柔,不听话也别惯着!掌握好度,不要被细胞牵着鼻子走

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发表于 2017-3-28 09:06:49 | 显示全部楼层

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发表于 2017-3-29 08:18:36 | 显示全部楼层
养细胞就像养孩子一样

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发表于 2017-3-29 11:47:48 | 显示全部楼层
养细胞真跟养孩子一样,正在为293F伤神

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发表于 2017-3-29 13:50:49 | 显示全部楼层
293细胞很好养的,只要用心对待!
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