HPV E6/E7 DNA检测，避免漏检

Jianbo

目前，市场上HPV（人乳头瘤病毒）检测产品众多，经过国家食品药品监督管理总局（CFDA）批准的产品有100多种，检测方法多样，根据检测靶点、检测种类不同，检测结果也会有所不同。

HPV基因组
HPVs是一种双链的小DNA病毒，具有7900个碱基对，由病毒蛋白外壳和核心DNA物质构成，无包膜。病毒基因组分为3个部分：早期基因区（E）、晚期基因区（L）及将早期区与晚期区分开的长调控区（LCR）。调控区主要调控病毒的转录，控制病毒蛋白和感染颗粒的产生。早期区编码E6、E7、E1、E2、E4和E5蛋白质，主要参与病毒DNA的复制、转录。晚期区编码L1、L2蛋白质，分别是病毒的主要和次要衣壳蛋白。早期表达基因E6、E7是致癌基因，编码病毒癌蛋白，在细胞转化和维持转化组织恶性表型的过程中起着至关重要的作用[1]。

检测靶点
目前的检测方法中，跟进检测靶点的不同主要分为三种：L1 DNA、E6/E7 DNA、E6/E7 mRNA，不同靶点的检测区别如下图所示：

图. 子宫颈病变过程中不同靶点的量的变化趋势

在CIN I 期及之前，HPV 主要以游离状态存在于宿主细胞中，在病变进一步发展的过程中，HPV 基因组会整合到宿主细胞基因组，随着病变程度的增加，HPV基因组最终以整合状态存在。在整合发生之后，L1 DNA 通常丢失，而E6/E7 DNA 无论在病毒游离状态还是整合状态会一直存在，致癌E6E7 mRNA 也会在基因组发生整合之后大量表达[2]。

由此可见，以L1基因作检测靶点，会导致因HPV基因组整合而造成的漏检；而以E6/E7 mRNA作检测靶点，会使得检测窗口延后，不利于HPV感染的早期监控。

靶点比较
从低级别病变发展为癌的过程中，HPV基因组会发生整合。在整合过程中，E6/E7基因持续存在，L1基因可能会丢失。在宫颈高级别病变中，由于基因组的整合会使L1基因有丢失的可能，因此，以L1基因作检测靶点会对HPV有漏检的可能。相反，如果检测靶点设计在E6/E7基因，不管HPV基因组是否发生整合，都可以检测出HPV阳性的病人[3]。如果检测E6/E7，可发现所有癌症，包括L1丢失的癌症[4]。因此，最好以致癌基因E6/E7为检测靶点，以免造成漏检。

目前经过CFDA认证的产品绝大多数是DNA检测产品，另外还有mRNA检测产品。有文献显示，相比HPV DNA检测，mRNA检测灵敏度稍逊，但是特异性更好。总体来说，这些研究均显示HPV E6/E7 mRNA阳性的情况下，患者病变进一步发展的可能性较大[5]。但是，mRNA检测主要是针对14种高危型的检测，检测出阳性之后往往需要进一步做分型检测。另外，目前国际上几大宫颈癌权威机构颁布的指南里面均是针对HPV DNA检测后不同型别的处理意见，还没有mRNA检测阳性的处理指导。因此，我们在选择HPV mRNA检测产品时要保持谨慎态度。

总之，相较于以L1 DNA和E6/E7 mRNA作检测靶点，检测E6/E7 DNA在避免漏检的同时，能够保证灵敏度和特异性，更适合作为HPV检测的靶点。
  
[1] 胡家昌. 高危型HPVDNA与宿主基因整合及致癌机理的相关研究进展. 现代妇产科进展, 2015, 24(5):384-386
[2] Human papillomavirus is a necessary cause of invasive cervical cancer worldwide. Journal of Pathology, 1999, 189(1):12
[3] F Karlsen, M Kalantari, A Jenkins, E Pettersen, G Kristensen Use of Multiple PCR Primer Sets for Optimal Detection of Human Papillomavirus. Journal of Clinical Microbiology, 1996, 34(9):2095-2100
[4] W.A.A. Tjalma, C.E. Depuydt. Cervical cancer screening: which HPV test should be used—L1 or E6/E7? European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology 170 (2013) 45–46.
[5] 刘桐宇, 谢榕. 人乳头瘤病毒E6、E7基因致癌机制及临床应用进展. 中华生物医学工程杂志, 2013, 19(2):172-176


（来源：生物谷）