常见的致动物疾病性病毒——伪狂犬病病毒

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伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus）又称猪疱疹病毒Ⅰ型，属于疱疹病毒科（Herpesviridae）疱疹病毒甲亚科（Alphaherpesvirinae）。它是引起多种家畜和野生动物以发热、奇痒及脑脊髓炎为主要症状的一种疱疹病毒。由于本病的临床症状同狂犬病有类似之处，曾被误认为狂犬病，后来才起用了“伪狂犬病”这一病名。本病广泛分布于世界各地。
一、生物学特性
本病毒呈圆形或椭圆形，为双股DNA，20面体立体对称，位于核心无囊膜的病毒粒子直径约110～150nm，位于胞浆内带囊膜的成熟病毒粒子的直径约180nm。衣壳壳粒的长度约12nm、宽9nm，其空心部分的直径约4nm.
二、抵抗力
本病毒是疱疹病毒中抵抗力比较强的一种，在畜舍内干草上的病毒，夏季存活30d，冬季达46d。病毒在pH4～9之间保持稳定。在50％甘油盐水中保存的病料0～6℃下154d感染力仅轻度下降，保存到3年时仍具感染力。
三、抗原性
伪狂犬病病毒只有一个血清型，但毒株之间的毒力有强弱之分。本病毒与人的单纯疱疹病毒、马立克氏病病毒有微弱的交叉反应。病毒颗粒表面没有血凝素抗原。
四、培养特性
（一）鸡胚培养  病毒可通过多种途径感染鸡胚，适应后很容易连续传代。鸡胚感染后约4d，绒毛尿囊膜上产生灰白色痘样病变，迅速侵入中枢神经系统的所有部分，导致胚胎的头盖部突起。
（二）细胞培养  本病毒可在鸡胚成纤维细胞，猪、绵羊、牛、兔、狗、猫、猴和马的肾原代细胞，猪和牛的睾丸原代细胞，以及Hela、Hep-2、PK-15、BHK-21等传代细胞中增殖。以猪、兔、狗的细胞和鸡胚成纤维细胞最为敏感。感染细胞变圆，形成合胞体。毒株的毒力越强，合胞体形成越多。
五、致病性
本病毒可感染多种家畜、禽类及野生动物，引起发热，剧烈发痒和急性脑脊髓炎症状。本病毒对小猪危害最严重，成年猪症状轻微，死亡很少，并常成为隐性带毒者。猪不发生瘙痒，但母猪流产，产仔减少。不足15d的仔猪，通常在出现症状后12～24h内死亡。本病造成的损失与年龄成负相关性，成年猪很少死亡，而仔猪的死亡率可达到100％。
牛患病后在皮肤的某部位出现狂痒是本病的基本特征。狗和猫的症状与牛相似，但不攻击人和其他动物，常在出现症状后24～36h死亡。山羊无瘙痒症状，主要表现不安、大量出汗、后期出现痉挛和麻痹。多在24～48h内死亡。人可能具有某种程度的易感性。
六、微生物学诊断
（一）病毒分离  在病的急性期，用棉拭子在口咽部取样。病死动物取扁桃体、颈淋巴结和鼻粘膜。收集局部水肿液和该区域的神经干。部分采集脊髓和脑（最好是中脑、脑桥和延脑）。
1．鸡胚接种  本病毒可适应鸡胚，接种4d后，在绒毛尿囊膜上可见白色痘斑性病变，并迅速侵袭整个神经系统，导致胚胎头盖骨突起。
2．动物接种  病料皮下接种兔，能产生典型的瘙痒症状，2d后兔舐接种部位，以后更狂暴，啃咬皮肤。症状持续4～6h，兔卧地不起，阵发性痉挛和呼吸困难死亡。经兔接种后的材料则可感染豚鼠和小白鼠，引起瘙痒症状。
3．细胞培养  猪肾传代细胞系（如PK-15）以及猪、兔和牛的原代肾细胞培养最适于病毒的分离培养。将待检的脑组织或扁桃体研磨成浆，用Hanks液或PBS液稀释成10％悬液，经2000r／min离心10min，取上清，接种长成单层的细胞培养液内，37℃吸附1h，加维持液继续培养。病变出现时间与样品中病毒含量多少有关，最早可在接种后18h出现细胞病变，晚的则在96h以后，一般在接种后48h。此时，将细胞培养物作苏木紫—伊红染色，镜检可见嗜酸性核内包涵体。据报道，兔肾细胞培养对本病毒特别易感，高于鸡胚和实验动物。
（二）血清学检查
1．血清中和试验  一般用乳兔肾细胞或PK-15细胞。病毒滴度不低于105TCID50／0.1ml，使用滴度在100～500TCID50范围内。被检血清作倍比稀释。血清中和效价在1:2时可疑，1:4时为阳性。
2．ELISA试验  某些国家已把ELISA（间接法）作为诊断该病的标准方法。但该病毒的抗体与牛疱疹病毒Ⅰ型抗体有交叉反应。在同等条件下，用已接种病毒和空白细胞培养物分别制备病毒抗原和对照细胞抗原。如被检血清在病毒抗原孔的吸收值较对照孔高0.15以上者判为阳性。
3．荧光抗体试验  采取新鲜病料，做冰冻切片进行荧光抗体染色（间接法）检查，该法比病毒分离更快速。
4．琼脂扩散试验  抗原用PK-15细胞系生产制备，待检猪血清不稀释，25℃左右14～18h即可判定。但该方法尚需在实践中进一步验证。
七、免疫与治疗
本病尚无有效药物治疗，紧急情况下用高免血清治疗，可降低死亡率。目前针对该病的弱毒苗、弱毒灭活苗、野毒灭活苗及基因缺失苗已研制成功，在许多流行地区应用，能有效减缓猪感染后的临床症状，大大降低本病的发生，减少经济损失。但靠疫苗接种不能消灭本病，一般无本病猪场禁用疫苗。还有研究证明，当猪同时接种两种不同的基因缺失疫苗后，病毒会发生基因重组现象，因此在同一个动物体中只准使用一种基因缺失苗，以避免疫苗毒株间的重组。