[转移贴]HBV的受体为什么不好找呢？

hantavirus

原贴由kinglemon 发表于 2009-6-3 08:49 ：

我是新手 大牛指教阿 hehe。同样是流行病毒 HIV的受体10年前就清楚了 HCV的受体看来很复杂 不过也成功找到了（4个蛋白？） 为什么HBV的受体进展很小呢？这么多年下来 只找到一些似是而非的binding protein 没有一个能够成功的把非肝源细胞系变成HBV易感的 甚至这些binding protein的重要性也很值得怀疑...（唯一一个号称能够使大鼠肝细胞系成为HBV易感的是Annexin V 不过没看到什么后续工作）

大家说说 到底是什么原因或者困难呢？

我很想知道 有没有Lab系统性的做过cDNA library(用人肝细胞library) screen找HBV的receptor 按说要想找receptor这是个很明显的办法 但是我没查到过这样的paper

hantavirus

bigben发表于 2009-6-3 13:02：

好话题
确实是个谜

贴上图，把HBV膜蛋白，以及和preS1，preS2，S蛋白相互作用的蛋白总结一下
来自Glebe, D. and S. Urban, Viral and cellular determinants involved in hepadnaviral entry. World J Gastroenterol, 2007. 13(1): p. 22-38.
http://www.wjgnet.com/1007-9327/13/22.pdf

hantavirus

kinglemon 发表于 2009-6-3 13:25 ：

To bigben


谢谢。我大概看了一些这方面的paper 感觉主要是用生化方法找到的binding protein （in vitro binding或者是表达在细胞表面然后做binding assay） 感觉这不是找receptor的正确思路啊 (binding并不意味着能帮助entry 而且这么找的binding protein假阳性肯定很高) 所以我才很好奇为什么没有人做个好点的screen 很怀疑是不是有人做了但是做不出来或者发表了但是我没看到 来这里问问大牛们 hehe

hantavirus

bigben 发表于 2009-6-3 14:17：

是的，不少是用pull down得出来的
可能因为和HBV同源的DHBV的俩受体就是用类似方法找出来的吧：glycine decarboxylase和Carboxypeptidase D，不过关于这俩个受体还没有最终确认，后面一个好像得到普遍承认
我也觉得奇怪，为什么没有人把上面列的一堆蛋白系统性的比较一下，排除掉假阳性的
关于HBV，有说发现低亲和力的受体：glycosaminoglycan
Leistner, C.M., S. Gruen-Bernhard, and D. Glebe, Role of glycosaminoglycans for binding and infection of hepatitis B virus. Cell Microbiol, 2008. 10(1): p. 122-33.
现在普遍认为是超过一个受体蛋白介导吸附，融合
对于HBV，有一个问题是，没有合适的细胞系
有细胞系HepG2，Huh7支持HBV的复制，但是前期阶段不知到限制在哪里：或许细胞系上受体都没有问题，处在融合这一阶段，或者出在把rcDNA释放到核内这一阶段。。。

hantavirus

kinglemon 发表于 2009-6-3 14:33 ：


To 楼上的大奔
你说的有道理。。如果HBV从进入细胞到开始转录/复制 都需要比较特殊的蛋白（比如说 只有原代肝细胞才有 而HepG2都可能少很多 比如entry+进核） 那在cell ine里面做screen能找到相关蛋白就太难了（得这n个基因同时转染一个细胞才行）。。。

hantavirus

biotcm 发表于 2009-6-3 14:53 ：


把rcDNA释放到核内这一阶段。。。

这个可以排除的

hantavirus

bigben 发表于 2009-6-3 18:03 ：

To  biotcm

我也是印象中记得，原来出处记不得了

不过我在Melegari, M., S.K. Wolf, and R.J. Schneider, Hepatitis B virus DNA replication is coordinated by core protein serine phosphorylation and HBx expression. J Virol, 2005. 79(15): p. 9810-20.讨论里面看到一句话：
“In transfected HepG2 cells, viral nucleoparticle recycling does not occur at a significant level, since there is little or no formation of cccDNA.”

In transfected HepG2 cells, viral nucleoparticle recycling does not occur at a significant level也许提示在细胞系里面可能有困难，但是是不是决定性的，就不知道了

关于这个话题脱壳释放基因组入核，有一篇文章：
Rabe, B., et al. , Nuclear import of hepatitis B virus capsids and release of the viral genome. Proc Natl Acad Sci U S A, 2003. 100(17): p. 9849-54.

但是我不知道这篇文章告诉了我什么：）都是具体蛋白之间的相互作用，也没在讨论中讨论什么现象

但说回来，我觉得最大的限制可能在融合这一阶段