转移贴：关于血凝和TCID50？

rojjer

原帖由leceline 发表于23/8/2010 18:12
H1N1
今天测了一下鸡胚尿囊液的效价，终点在稀释1280时。
同时测了一下96-well plate mdck感染不同浓度HINI第三天的上清，差异有点显著（因为TPCK-TRYPSIN 浓度不一样）。无胰酶组算出来LogTCID50=-3.5,而0.5ug/ml胰酶组目测了一下是-5.几（具体没算），更奇怪的是胰酶1ug/ml和2ug/ml组的阴性对照（-virus+TPCK-Typsin）都有凝集（淡淡的一个环，同板有明显的环状孔），同时我也设了-virus-TPCK-Tryppsin组，无凝集产生。

问题1：测出来的1280怎么跟Reed-Munch方法里的TICD50换算？
    2：这两种判断效价的方法看来差异挺大，什么情况用哪种呢？
    3：胰酶的有无真的对virus infection影响很大，我们测TCID50时到底要不要加呢？
    4：阴性对照怎么会有凝集产生呢？是否跟溶血有关？今天采的血貌似有点溶血，但是测鸡胚尿囊液时阴性对照是完全不凝的。

请高手点拨一下，万分谢谢！

rojjer

hwqstrong 回复：
红细胞凝集试验是没法和TCID50换算的，这是两种测定流感病毒的方法。在没有胰酶的情况下低致病性的流感病毒的HA吸附到细胞上时不能裂解成HA1和HA2也就是不能感染复制，所以胰酶是要加的。要不然不会感染，当然向高致病性的H5N1自己就能裂解。

rojjer

wangfei2002523 回复：
流感病毒离子表面的HA是未裂解的吗？