求教猪瘟病毒的荧光抗体观察

序道

我有一个朋友养PK，然后猪瘟病毒感染，接着用的荧光抗体染，结果镜下效果不好，不知是没有洗好，还是细胞密度太大了，还有是我的奥林帕司IX71为什么荧光看的很暗啊
















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楼主：a_yuan

序道

4#xiamitiansheng8



我的经验是，一般情况下，猪瘟病毒感染24小时后进行免疫荧光检测，>80%的细胞可见荧光，看看你的毒种是强毒还是疫苗毒（强毒很好检测，疫苗毒由于增殖滴度低较难检测），一抗是针对哪个蛋白（单抗和多抗都没有很大区别，关键是有些蛋白不太好检测，如针对E2和NS3的荧光检测很容易，而针对E0的就差点，这可能与E0可分泌性表达有关），另外就是二抗差异，有些公司生产的荧光二抗要么无法检测到要么就是阴性对照细胞都是一片荧光，当然这种情况遇到的几率不大但也不能不考虑，最后就是荧光显微镜，有些显微镜用时太长荧光消耗大所以荧光看起来很弱，可以考虑换一台显微镜看看。