分泌型IgA的分离与鉴定

cao1976

（一）材料与试剂 1．初乳 2．SephadexG200 3．0.10Mol/L pH6.8PB液 4．0.01Mol/L pH7.4PB液 5．DEAE52

（二）操作方法 1．取初乳20ml，10 000rpm离心10min，弃去表面脂肪层及底部的沉淀物。 2．取乳清过SephadexG200柱（柱规格为2.50cm×90cm），以0.10Mol/L pH6.8PB液洗脱，第一峰为IgA（含IgG）。 3． 收集乳液，于0.01Mol/L pH7.4PB液中透析。 4． 将透析液浓缩至5mg/ml以上。 5． 过DE52层析柱，用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脱，洗下蛋白峰为IgG，弃去。 6． 换用0.10Mol/L pH6.8PB液或0.01Mol/L pH7.4PBS（0.10Mol/L NaCl）液洗脱， 收集洗脱液 ，即为较纯的IgA液。 7． 必要时，可再过一次SephadexG200柱。 8． 浓缩，鉴定