家蚕细胞培养讨论

cao1976

原贴由JASON198205 发表于 2009-6-26 08:52
http://biosky.haotui.com/thread-10638-1-6.html?jdfwkey=ni0d61
各位战友，哪位有培养过家蚕细胞的经历（BmN），有照片的可以传上来供大家学习一下，有养过的总结一下心得让俺学习一下吧，谢谢啦！
最近要养这种细胞了，没有养过这种细胞，有几点弄不明白
1，这种细胞形态如何？
2，这种细胞需要氧气或者二氧化碳吗？我用的是普通的培养箱，不通二氧化碳，我要用Corning公司的那种T25或T75方瓶培养，是否需要旋紧方瓶的盖子呢？
3，培养基准备用TC-100加GIBCO胎牛血清，但有的文献上说要用昆虫等级的，我找了公司咨询，没有这种血清，不知是否影响？
4，这种细胞传代时需要胰酶消化还是和SF9细胞一样用拍打和移液管轻吹下来啊？
多谢各位战友指导！


以下为会员的回复：
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gpj402 发表于 2009-6-26 09:06 ：1，这种细胞形态如何？
形态上不记得有什么特殊的地方。
2，这种细胞需要氧气或者二氧化碳吗？我用的是普通的培养箱，不通二氧化碳，我要用Corning公司的那种T25或T75方瓶培养，是否需要旋紧方瓶的盖子呢？
普通培养箱即可，可以用T25进行培养。
3，培养基准备用TC-100加GIBCO胎牛血清，但有的文献上说要用昆虫等级的，我找了公司咨询，没有这种血清，不知是否影响？
没有单纯的昆虫等级，当时我们是用TC-100培养的。如果我没有记错的话，stare024在做这方面的东西，具体的东西你可以去问他。
4，这种细胞传代时需要胰酶消化还是和SF9细胞一样用拍打和移液管轻吹下来啊？
吹下来就可以啦。

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stare024 发表于 2009-6-26 09:20 ：RE: 家蚕细胞培养讨论
我实验室养BmN细胞已经多年了。
该细胞是家蚕卵巢细胞株。
使用TC100+10%FBS。
细胞正常状态呈梭型。
普通培养箱就可以，一般是26--27°C培养
不用CO2培养。
这个细胞还是很好养的。
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JASON198205 发表于 2009-6-30 11:31 ：我要用Corning公司的那种T25或T75方瓶培养，是否需要旋紧方瓶的盖子呢？我有一位同事培养时旋紧瓶口，是什么原因呢？
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gpj402 发表于 2009-7-1 21:23 ：JASON198205 问题真细心。瓶盖还是要旋紧的，不过你不用担心那些细胞会窒息。那些瓶子的瓶盖是可以透气的。