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新手入园,请教病毒拷贝数计算问题

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病毒学院小学生

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发表于 2018-11-30 16:58:21 | 显示全部楼层 |阅读模式
我们在实验的过程中,为了检测攻毒后,小鼠各脏器中病毒的拷贝数,以病毒的3‘UTR 一段制作了标准曲线,随后检测样品,处死小鼠,分别取心、肝、脾、肺、肾、气管等部位,Trizol 提取RNA,RNA体积20 μL,反转录1000 ng/μL RNA,反转录体系为10 μL。想请教一下病毒的拷贝数具体怎么计算?谢谢各位。

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病毒学院中学生

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发表于 7 天前 | 显示全部楼层
标准曲线以含有3‘UTR 的质粒为标准品,如此就可以知道标准品的ng和拷贝数的关系,如此标准品以拷贝数定义,这样采取荧光定量PCR方法就可以换算出检品的copy数。
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