设为首页收藏本站

中国病毒学论坛|我们一直在努力!

 找回密码
 立即注册

QQ登录

只需一步,快速开始

搜索
热搜: 活动 交友 discuz
查看: 246|回复: 2

非洲猪瘟病毒研究获进展

[复制链接]

293

帖子

150

学分

2880

金币

版主

Rank: 7Rank: 7

积分
150
发表于 2019-2-27 13:48:21 | 显示全部楼层 |阅读模式

复旦大学生命科学学院、遗传工程国家重点实验室甘建华课题组与李继喜课题组合作研究揭示了非洲猪瘟病毒(ASFV)DNA连接酶(AsfvDNAL)的分子机制。该项成果近日在线发表于《自然—通讯》。

ASFV是一种独特的双链DNA病毒,能导致受感染猪死亡,受到了科研人员的广泛关注,尽管已研究了100多年,目前仍没有任何有效的疫苗被报道。ASFV对全球多个国家和地区的猪饲养业都是一种巨大的威胁,并于2018年在中国首度暴发,导致了严重的经济损失。

ASFV中有一套完整的DNA修复通路。与通常的DNA修复通路不同,ASFV的DNA修复通路中的聚合酶和连接酶的保真性都非常低,在ASFV基因组的修复和突变过程中均发挥了关键作用。

据悉,该团队此前研究发现,AsfvPolX拥有一个独特的磷酸根识别位点,对其底物结合和催化活性十分关键。“AsfvDNAL与同源蛋白的序列相似性很低,但其容忍碱基错配的分子机制还不明确。”该论文第一作者陈屹勍告诉《中国科学报》,研究人员利用X射线晶体学方法,成功解析了AsfvDNAL与不同类型DNA复合物的高分辨率结构。

晶体结构显示,AsfvDNAL具有一个独特的DNA结合结构域,该结构域对底物结合十分重要。虽然AsfvDNAL与常见的DNA连接酶在催化机制方面保守,但AsfvDNAL在底物催化位点附近具有一些明显不同的氨基酸组成。

“蛋白突变、体外DNA结合以及活性研究显示,催化位点附近的氨基酸对催化形式AsfvDNAL-DNA复合物的形成及活性至关重要。”甘建华表示,这项研究成果为针对非洲猪瘟病毒DNA修复通路蛋白的药物设计提供了结构基础。(生物谷Bioon.com)


2076

帖子

2793

学分

3万

金币

管理员

Rank: 9Rank: 9Rank: 9Rank: 9

积分
2793
发表于 2019-3-7 10:00:01 | 显示全部楼层
近期,复旦大学生命科学学院、遗传工程国家重点实验室甘建华课题组与李继喜课题组合作研究揭示了非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)DNA连接酶(AsfvDNAL)的分子机制,相关研究成果在线发表于《自然•通讯》(Nature Communications),文章题为Structure of the error-prone DNA ligase of African swine fever virus identifies critical active site residues。该研究用X-射线晶体学方法解析了AsfvDNAL与不同类型DNA复合物的结构,揭示了AsfvDNAL结合和催化底物连接的分子机制,为针对非洲猪瘟病毒DNA修复通路蛋白的药物设计提供了结构基础。





ASFV病毒是一种独特的双链DNA病毒,既能感染野生猪,也能感染家猪。一旦爆发,将会导致近100%受感染猪的死亡。自1921年被发现以来,ASFV病毒受到了科研人员的广泛关注,但目前仍没有任何有效的疫苗被报道。ASFV病毒对全球多个国家和地区的猪饲养业都是一种巨大的威胁,并于2018年在中国首度爆发,导致了严重的经济损失。ASFV病毒编码了多个蛋白,形成了一套完整的DNA修复通路。与通常的DNA修复通路不同,ASFV DNA修复通路中的DNA 聚合酶(AsfvPolX)和连接酶AsfvDNAL的保真性都非常低,在ASFV病毒基因组的修复和突变过程中均发挥了关键作用。本团队早期研究发现,AsfvPolX拥有一个独特的磷酸根识别位点,对其底物结合和催化活性十分关键(Plos Biology, 2017)。





图1. AsfvDNAL与DNA底物复合物的晶体结构



AsfvDNAL与同源蛋白的序列相似性很低,其容忍碱基错配的分子机制还不明确。针对上述问题,甘建华、李继喜和黄震团队利用晶体学手段,成功解析了AsfvDNAL与不同DNA底物的高分辨率结构(图1)。晶体结构显示,AsfvDNAL的N-端具有一个独特的DNA结合结构域(NTD),该结构域对底物结合十分重要。虽然AsfvDNAL与常见的DNA连接酶在催化机制方面保守,AsfvDNAL在底物催化位点附近具有一些明显不同的氨基酸组成。蛋白突变、体外DNA结合以及活性研究显示,催化位点附近的氨基酸对催化形式AsfvDNAL-DNA复合物的形成及活性至关重要。



复旦大学生命科学学院博士生陈屹勍为论文的第一作者,复旦大学生命科学学院教授甘建华、李继喜以及四川大学教授黄震为并列通讯作者。该研究还得到了复旦大学生命科学学院麻锦彪教授课题组的大力支持,并获得了国家自然科学基金和科技部国家重点研发计划的资助。



Abstract
African swine fever virus (ASFV) is contagious and can cause highly lethal disease in pigs. ASFV DNA ligase (AsfvLIG) is one of the most error-prone ligases identified to date; it catalyzes DNA joining reaction during DNA repair process of ASFV and plays important roles in mutagenesis of the viral genome. Here, we report four AsfvLIGNA complex structures and demonstrate that AsfvLIG has a unique N-terminal domain (NTD) that plays critical roles in substrate binding and catalytic complex assembly. In combination with mutagenesis, in vitro binding and catalytic assays, our study reveals that four unique active site residues (Asn153 and Leu211 of the AD domain; Leu402 and Gln403 of the OB domain) are crucial for the catalytic efficiency of AsfvLIG. These unique structural features can serve as potential targets for small molecule design, which could impair genome repair in ASFV and help combat this virus in the future.

来源:复旦大学

本期编辑:Tony

293

帖子

150

学分

2880

金币

版主

Rank: 7Rank: 7

积分
150
 楼主| 发表于 2019-3-7 11:09:39 | 显示全部楼层
wwwkkk83 发表于 2019-3-7 10:00
近期,复旦大学生命科学学院、遗传工程国家重点实验室甘建华课题组与李继喜课题组合作研究揭示了非洲猪瘟病 ...

您需要登录后才可以回帖 登录 | 立即注册

本版积分规则

QQ|论坛App下载|Archiver|小黑屋|中国病毒学论坛    

GMT+8, 2019-8-24 06:39 , Processed in 0.118572 second(s), 31 queries .

Powered by Discuz! X3.2

© 2001-2013 Comsenz Inc.

快速回复 返回顶部 返回列表