本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky8 c' ]# L- z, \" `/ s: F% h0 q
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。( g& q$ |/ ^4 b' h
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。9 q# ?7 a7 Y: A$ M) ^) k: J' f
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。, B1 Q. y) @$ M9 u& H( n+ M9 N
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目录
, q" C# ] Z# `# K第1篇 PCR导论
) N/ E; O$ I3 Y @( P1 建立一个PCR实验室7 }$ W1 c* o7 v5 d6 P6 | a) i
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
; Y% w' \6 T5 U9 h m$ M0 z }3 高保真PCR酶" y8 p$ t; o, V6 f8 ?
4 PCR的最优化和常见问题解析) T: J9 U! F. Q7 }
5 富含GC片段的PCR扩增
( J2 ?) d7 h' B: _6 精确扩增大片段的技巧- o9 y* a2 x! ^5 H9 M' X
7 PCR引物设计2 }5 @4 ?2 k' e. Q# }# L- F
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序& O0 _$ V9 L M+ X
第2篇 样品的制备
( F! J4 J+ U& K5 E% B* Q" D9 DNA的纯化
& e3 C7 P. W1 W- Q10 RNA的纯化" @# s/ |- M; i) e
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达$ c" B- e% [7 T( A7 t
12 克服PCR受抑制的策略! v$ Q4 \1 v% [8 f' \# [* v
第3篇 RT-PCR方法
. t/ s5 Y5 R. [5 L! c z13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用9 k( \$ S% s+ s& D& F- |. E4 L& K
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler& V& ]3 I, i4 ]+ c1 Y3 \
15 定量PCR的新技术
. g& V& ?9 x" N& n" x) ^, e( S! q6 x7 e16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
. `" q: E7 ` A5 O. h$ ~第4篇 PCR产物的检测:专门应用/ S" N( j0 U3 ^8 R) N
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
" {, E( x# w* e9 i18 单链构象多态性分析
/ u( Y8 x& ^) J/ T+ B8 ^- \ y19 逆转录酶原位PCR
+ l; z( w- L+ R2 R# L& |20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法( S; P2 t' r! N/ c8 o( e
第5篇 用PCR分析基因的差异表达2 G! C6 R. n: \5 [" F" N
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用+ x! u5 R" A5 y) w( ~; }
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
' P/ ]% W' T8 t% g9 W8 |: B& x23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
$ @- l' _8 L9 q9 ^7 X第6篇 用PCR进行克隆
, R- {: Z' L6 t8 o24 以PCR为基础的文库筛选方法9 p+ o, h2 s6 @6 @& C2 e' Z
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
) y0 d( I2 v8 Z* X26 用PCR合成和分析DNA文库
8 o& ~. h. X3 Q2 U, ] Q第7篇 PCR产物的克隆
! \: s1 O* X, d5 e27 克隆PCR产物的策略" a, W/ B3 w! B% T0 {' f1 B S. }
28 PCR产物双向和定向克隆; a( W6 h- ^! |$ t
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建2 L& e; I9 j( E' F$ D: s* v# h
第8篇 利用PCR进行诱变+ i7 B/ r# ] c* O/ P
30 诱变PCR
- E* ?; `& ~3 q# {31 快速PCR定点突变
) v2 G4 Z' t- ~1 y0 f1 q4 e32 利用PCR来突变和合成新的重组基因+ G! Y. `# y& _
33 流线型基因装配PCR3 D0 \9 X1 D3 d: u, y+ ^
附录1 专利
9 C" U. e+ L( U附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰- J- ~6 O- c. L, e
附录3 注意事项7 J* q! q+ K1 Z& u F5 M
附录4 供应商
& @6 M8 Q4 i$ z( X+ d索引
- }/ U2 N8 }. c+ g7 x& Y* a8 x
. S5 S/ S9 N- J8 i; i$ x9 |2 {3 r( P: @
! [0 r. \) G! N下载地址：
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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