本帖转自:http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者:walkundersky1 |& I, G1 D% |2 \$ k
9 { ?! \7 r- s; R( P! B% q" x) w聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来,经过不断的开发和改进,现在已经广泛应用在诸多领域,是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。% k" }2 l0 F, K/ i( C# A4 y1 \. e
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer:A Laboratory Manual第二版的影印本,是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿,是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进,从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧,无所不至,令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
& ^& [. j7 E+ T/ m8 k3 t 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇,可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考,既是实验室必备的工具书,也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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/ b3 K, y7 f K, s目录
3 g) n; n' x5 D5 s0 P2 H第1篇 PCR导论
7 r2 d. x+ |5 m3 v# q: I1 建立一个PCR实验室
0 J% q8 Y5 b; o' w2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略$ ]! V+ m4 z4 J" E' l8 I
3 高保真PCR酶
* R. Y3 j( w1 h2 m- q2 N% z4 PCR的最优化和常见问题解析
! P" i: u7 m2 H' j' c4 v0 {5 富含GC片段的PCR扩增7 y( {! O' q ~2 P% K
6 精确扩增大片段的技巧
& x* @- y% c, l/ o6 N2 g$ V7 PCR引物设计
) |+ H. C0 g5 y. O8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
; j( U- \2 ~- ?- n0 @- x4 S第2篇 样品的制备
; Q# H# t* B8 \1 i- ^% t6 ^9 DNA的纯化8 a4 R$ z2 L% }8 L; q) Y
10 RNA的纯化
; K6 ?: k8 s+ @9 f11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
" a- ]" w1 {' C1 F12 克服PCR受抑制的策略
6 W9 b* I. s9 I% ^6 `第3篇 RT-PCR方法) j. o7 o Q9 X1 O& r# |4 ]
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
+ H2 K1 Q( V( ?5 B. A4 W' m14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler5 W* J! C4 v* @* V2 [# w1 y- z5 [" f9 [
15 定量PCR的新技术
) G* |( T5 o2 x r7 ]16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增& P; [% X$ O8 e8 E; Z
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
% |! w: |3 d( E17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法! }7 ]; }/ v+ L* d' n
18 单链构象多态性分析
7 E3 i# D( _+ r0 S19 逆转录酶原位PCR
/ o0 j1 Y- X3 j6 [* t- ^20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法2 ~) [0 }9 _, M" G" a }6 R6 E
第5篇 用PCR分析基因的差异表达) }. j3 }( f3 F, b5 p* {
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
' b+ X1 p5 s5 z22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
! o* A7 k8 D4 P% [23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术5 ?; H7 s3 C! z
第6篇 用PCR进行克隆( B, U* u0 D9 K* n
24 以PCR为基础的文库筛选方法; V3 D- W, Y4 I! m4 j/ n* Y4 M& X
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进- O6 p y. y' y4 j9 W# ]
26 用PCR合成和分析DNA文库7 n1 v' M: O; `9 D6 {5 R
第7篇 PCR产物的克隆7 e7 K8 l# U* ~
27 克隆PCR产物的策略
% g8 w( n1 j' @% h28 PCR产物双向和定向克隆- Z1 r3 }* {/ }/ E- D$ o
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建& v8 m$ k/ m: K ]
第8篇 利用PCR进行诱变
3 U5 G: M5 E0 L30 诱变PCR
' @& K* o' o" k H# m" d31 快速PCR定点突变 ^4 t, p d' S, P+ Q* Q& v
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因4 d" v% ~" k" e7 y2 _
33 流线型基因装配PCR
: u, E. T) [8 l& j" j/ U }' z0 w附录1 专利' G% z3 N! ^7 [ ~6 C! V
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
% `6 C$ I& ^+ i4 u4 f0 E5 r/ T附录3 注意事项
5 r; h" \6 m9 ~4 r& Q7 _5 J# O9 g附录4 供应商/ W! s- @; o; Y6 X9 d
索引2 n- {: t. d9 X/ ]7 P, L
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