本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。# _; @$ l' B1 J
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
) R' s9 r( m" G$ i: R" U6 ] 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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: }' Q* d( I0 J; c/ r7 }7 o6 {目录, A9 }+ R1 b7 y/ i) T( ?( e
第1篇 PCR导论
% h. e9 c* r6 Q) I9 g& M0 I/ i1 建立一个PCR实验室
4 r9 F& o: i7 C2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
1 g+ J: R B: q# K1 a: e6 N- }4 R3 高保真PCR酶" M) e& m4 V ~
4 PCR的最优化和常见问题解析% O' x: ?1 X& X; I7 v6 `
5 富含GC片段的PCR扩增) p5 C4 e% R' b7 D0 m" V0 c! s
6 精确扩增大片段的技巧
4 T+ Z+ v# J& R# Y+ j, W7 PCR引物设计3 V, c: ~5 R4 V" b
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
) ?9 ?; ~- a8 w% }5 \' @, O第2篇 样品的制备1 B- D1 t# l. l: o' A: g+ A
9 DNA的纯化8 z/ F/ P( c2 r6 `1 {
10 RNA的纯化6 A, Y7 F- `2 x$ Y+ c9 a4 Y3 I
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
8 C5 j$ t/ @% r& W; A9 t2 p6 a12 克服PCR受抑制的策略
9 _* H' S* R5 x8 ?/ {1 o第3篇 RT-PCR方法! c8 k% A4 C' Y& s1 a4 U
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
8 w4 u7 _4 c3 C! _14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
; m& N' ]7 L, y( q15 定量PCR的新技术( a) ^, |/ |( b3 k; `& y" y& ^2 E6 N
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增0 ?+ R% ~/ E5 R- O4 c
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
6 O9 @ Y" h$ v# m2 o% O6 f2 s) O8 ^17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法$ e8 K1 @& B8 T. q q
18 单链构象多态性分析
; `2 L7 A' s }19 逆转录酶原位PCR7 K; s# J" d& Z( _/ [0 A8 N9 b
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法5 E% s0 B7 g0 N ~
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
7 p% Y# b! q' b) W J21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用& _! f. h- j2 F' a( H$ P1 Q- \
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因# A+ }& w N3 i. f6 `: N* H
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术 w, z9 M9 g. C; C2 E$ `3 c% c& ~& S2 X
第6篇 用PCR进行克隆
0 Y5 N9 z `! j0 n6 D24 以PCR为基础的文库筛选方法, E. C |, |) b' V1 S8 R: k# \. V
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
* L8 y7 i# e- @% ^6 \+ `26 用PCR合成和分析DNA文库
; j! }5 p- k, b: l) [第7篇 PCR产物的克隆- g! \3 u. K. [) m4 ~$ n) v! [
27 克隆PCR产物的策略
Z) T. m8 m( U- e, j) Y! L9 q28 PCR产物双向和定向克隆
( G* X7 D! s* K+ X% [$ ?29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建2 d/ T# K0 Q, V- N. f
第8篇 利用PCR进行诱变' `) b. Q& b- T \- `
30 诱变PCR
* _' \. z# X" }) N- F31 快速PCR定点突变3 g9 t+ Y" d1 `, a/ D* Y
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
! m, z6 n+ |+ u/ @8 P33 流线型基因装配PCR
& j4 v& P& X( d+ T. e S# C Y/ t1 d附录1 专利
) z9 b/ ?9 A1 E3 f9 |& Q8 i附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰: Q4 m+ |1 Z3 q% t$ A% z E% @
附录3 注意事项 z/ M! ~ J* f% X% o
附录4 供应商
2 d6 c1 M& r7 q: l2 W9 K索引# X, \* ^ T3 h( [
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4 i6 \3 O( ~( w5 ^. _9 y- H下载地址：' p. c/ g3 O( V/ {$ i
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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