本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky. _7 i) B- H; X$ T' K
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。3 R. I, C0 b- V8 y4 Y
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
+ R/ C! \: k! F- w 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。2 d! B6 L* m* G. d5 L9 G# |' f
5 k* O( T5 P% e4 v t目录6 `5 j1 |. R/ w) p; A0 }" O
第1篇 PCR导论6 r. h0 S2 W0 U9 k- `' q
1 建立一个PCR实验室+ _9 b+ r: e% M2 o ^5 Q6 g
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
) g! c4 M$ ~! y/ b6 F0 R2 k9 q: ^3 高保真PCR酶
7 D" M: \& M: c4 PCR的最优化和常见问题解析4 l) o7 ^/ R# C3 u' C% L
5 富含GC片段的PCR扩增3 |3 G y( o2 k+ O- V' E7 `% B
6 精确扩增大片段的技巧
5 W3 G) H+ l- ~6 K# r7 PCR引物设计" C7 O8 W" U$ f! u1 n( A
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序+ }, G" E; A. v
第2篇 样品的制备2 V4 P0 h8 |) l! r
9 DNA的纯化8 B7 j0 r- Z0 u$ K: f% d2 r
10 RNA的纯化
A$ {* m# G1 n/ g2 M" I n/ d11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达1 L5 H) N1 ?& e
12 克服PCR受抑制的策略0 _" h5 l8 c X+ n7 i
第3篇 RT-PCR方法
. m. O i% F; B4 L! H9 c13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用8 P3 @+ B2 \# {, Z/ k0 E
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
$ a8 q! e3 R1 L) ~- Y7 i15 定量PCR的新技术% i5 ^. Z1 s- S* F9 o9 O: p
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增9 W, k3 Q; T) j* p q" {6 L6 {
第4篇 PCR产物的检测:专门应用4 r( w" Q3 O' L) D; a! U& s5 _
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法% \" j# K1 B% K
18 单链构象多态性分析
: I5 n" X3 i0 r' {8 t9 @" s$ j19 逆转录酶原位PCR
* F& |* C. C+ |# t$ K; t20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法- ~( x+ a5 Q. m1 ]# y1 a
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
- }8 ]. N. c# ]8 ~7 I/ u" ~2 L6 q21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用) |" w6 w. S# ]) V' C
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
* Z, t2 k; `8 h; r" I23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
0 \# m: F9 c& k6 M! q; W9 O' P第6篇 用PCR进行克隆
% ?' u. O) u+ ~% j& k, R24 以PCR为基础的文库筛选方法
# c/ U4 d4 Z, t! s$ U25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
?- A. T* L" J4 p* D( c26 用PCR合成和分析DNA文库
, r: s! y* I* {第7篇 PCR产物的克隆% ^" Q3 f7 H8 m0 z% c8 o1 }
27 克隆PCR产物的策略
' B' y6 @4 j K1 _+ M4 `28 PCR产物双向和定向克隆
7 F& T& g+ }* b29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建5 f. }4 j) }7 T. q+ z* F
第8篇 利用PCR进行诱变. C1 R8 N0 {1 x* c
30 诱变PCR
5 N1 i, W7 p2 Z) Y; I31 快速PCR定点突变! t% }0 P& V; Y. c' B2 E
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
% ]9 w: C5 H' x) z" D) O" w/ a33 流线型基因装配PCR
, C. m4 J! |! n' t附录1 专利
K3 M8 p* C2 q' A9 |; H* i" b附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
o6 s0 i$ c9 T/ C! x0 Y; y附录3 注意事项
; d! E# G3 g y0 @; V: r6 c0 O; S' K5 }附录4 供应商
9 _! |: t8 r C5 U9 r$ l8 X索引# `/ A5 U* Y+ G. B
# V! R: k2 Z: w% Q5 G6 X
9 b$ N. S/ o1 K* M, b& g下载地址： q( O7 p7 m! }" s w0 a
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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