本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky+ W* ^4 \; L' L6 r
9 \8 h/ {$ E- w. ~; t聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。% W, W1 P6 Y8 d4 l2 [! z4 F9 K7 C# w
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。, l% [2 j: S N
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。0 S6 Y; j7 s" W$ {
# B! E: q& ~& K8 s' `9 k' o+ T
目录1 q0 P8 Y1 p/ H6 M1 l
第1篇 PCR导论
9 H3 y9 K( C" Q8 Q1 x2 R1 P1 o. d9 M1 建立一个PCR实验室8 b% p& K& J! U) M9 |
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略4 N! W5 ^ ^/ V M) @8 ?: N p; d* ^
3 高保真PCR酶' E+ d$ l, n' R2 Q G/ R* z: { u6 ~
4 PCR的最优化和常见问题解析+ l: Z; C5 `# i( p$ }6 U: [2 r
5 富含GC片段的PCR扩增) V& M6 S5 `9 m' t N7 U
6 精确扩增大片段的技巧6 F( \' }( Y$ Q8 p2 Q$ t
7 PCR引物设计
7 X' H" t ?6 d+ x8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
+ C$ i# H3 m+ H1 |第2篇 样品的制备. _& N1 e0 [4 y o; u6 v
9 DNA的纯化
J: b2 j: @4 l, `. b R) }10 RNA的纯化- o7 Q+ h( V/ d( }8 W! a* ?
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
9 v3 E) ?. n" Q3 H12 克服PCR受抑制的策略+ B8 Y ~# ?, {. {* ^2 F. A
第3篇 RT-PCR方法
+ U- j, ]! q4 k7 t/ Y8 i13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
& f( a7 l* f1 _9 r; m) r14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
4 ?; i$ t4 r$ V! X" E9 c, |15 定量PCR的新技术! ~- p) @ l, e1 M: o
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
0 |" S Z: ~( o第4篇 PCR产物的检测:专门应用% c9 c( f' g" g% ~
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
2 A0 ` \/ y; C& P: E$ {18 单链构象多态性分析
- s4 m2 U, U0 @2 x- G19 逆转录酶原位PCR
; ^$ i( m1 r$ |* Z7 V3 W4 k20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
# B8 V5 o' [6 {. W3 [# J( H第5篇 用PCR分析基因的差异表达, M/ |) \5 I+ T' ]6 g n/ `/ a
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
" F4 p7 }4 j4 h0 m; ~$ v9 [22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因! }/ W5 L* f8 {! h# T8 ~( S: [
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术5 Q) }8 o% R, ]* G% y
第6篇 用PCR进行克隆/ |- f" O7 c) a$ H; u! Y2 z1 k2 K$ K
24 以PCR为基础的文库筛选方法
Q0 ?# n4 s" {! Y2 l! O0 W25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
2 n Z4 y% A0 H n; X+ H5 E' G26 用PCR合成和分析DNA文库9 J/ G! C: {, D3 Y7 {# J
第7篇 PCR产物的克隆
+ e0 p* @: T- x0 e3 d27 克隆PCR产物的策略" G$ p* q ?5 w
28 PCR产物双向和定向克隆
4 O6 u/ G. H8 k29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
! F D; g3 x7 P& \+ s* m第8篇 利用PCR进行诱变
+ U/ R% m0 @: O z* k: D4 f# X30 诱变PCR' B! D7 i B5 v; i) ?6 i* M: L
31 快速PCR定点突变
2 k8 D: X& M% A5 z1 Q7 p32 利用PCR来突变和合成新的重组基因7 _6 N( R! w* |* o: |
33 流线型基因装配PCR. n0 e" w: f) _# `
附录1 专利- u" J/ g: p% F
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
: N* J/ d8 d8 w% _2 B附录3 注意事项. n( e0 g$ u, C
附录4 供应商
. U1 O5 G% Q1 p; g索引! J6 }# B# a# }" c2 `
8 J& @1 m# t1 Z! z1 U* W+ O. A9 ?, [* X* j7 e+ \
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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