本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky0 D3 s$ \5 r7 j
' m8 ]+ g! S% B9 c( O$ d聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。1 ?) U8 `9 r' G3 k- v
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。8 O5 l T5 F7 y& u: A* j
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
; p. p) H4 E+ c- ^) r0 p8 ~
- ~4 p' K% B7 {3 |# m7 P. _目录
' j( L+ Y& Q4 ^: V* X! r4 Z! l0 y第1篇 PCR导论4 c! v; ~, J1 z% Y$ {* W* J
1 建立一个PCR实验室2 C2 b' ]( ^, L% d
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
( Y& \, m& L( f. n; x8 g0 k1 r8 z3 高保真PCR酶# r: D3 v- Z9 y# y( B7 N- i
4 PCR的最优化和常见问题解析
4 I3 D: m- q3 c) a" N7 A5 富含GC片段的PCR扩增
: |7 C3 X' D1 C% s2 h+ z6 精确扩增大片段的技巧6 s1 j2 d; U# z% L! n
7 PCR引物设计
) @- T- Y$ u( s% q; z: B( j8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
7 V; g7 j. h5 Y I% f2 o1 m" g第2篇 样品的制备
% q1 b( C- O. I9 DNA的纯化+ f$ V2 D- n: `- j
10 RNA的纯化( z+ D$ y7 `! { M0 X
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达$ y; p# i3 t- Z' i5 C
12 克服PCR受抑制的策略
: i# v# T' }3 P$ \6 J! K, N0 n第3篇 RT-PCR方法
6 j6 p) N1 J: |0 N# R13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用/ P* d( x. N3 e# h2 a# U7 Q6 [
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
; @1 [% F. `4 [- }, H# E6 Q15 定量PCR的新技术
4 s8 H& M/ d* A A4 g8 ^16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增8 g! ~- @* K9 t& `
第4篇 PCR产物的检测:专门应用8 F% v4 O- |; q* ~5 c
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法" K0 a7 r, m9 v+ b" Q- M* d
18 单链构象多态性分析
0 b6 u/ }) h! j1 C) X19 逆转录酶原位PCR( h6 u& d/ F, n5 J Y
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
7 m2 ^& m3 v' g, t) H2 `第5篇 用PCR分析基因的差异表达
) }2 Z L% X, o. a" [8 }9 n6 ]! Q1 e21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
# i5 L0 e2 [ L22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
2 h N' I% p, c( k! p6 N' ~% P: R23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
, ?! q& e# [' A4 R3 D第6篇 用PCR进行克隆# z% P: C2 y& P7 h
24 以PCR为基础的文库筛选方法. E; q# C$ Q% L( g
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
) J4 n' W3 h+ S26 用PCR合成和分析DNA文库
- m) _9 w C$ n& l: `! q2 V- J第7篇 PCR产物的克隆
, l! y s4 {3 O, F3 C27 克隆PCR产物的策略
$ m6 ]+ v+ G' I% ~8 \28 PCR产物双向和定向克隆. A2 `" w* K" W3 [
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建5 y- x+ d1 [; \, z0 I% G0 r* e
第8篇 利用PCR进行诱变- ^7 M T$ B+ y8 D
30 诱变PCR
' V( m. I" \: @3 ?' G31 快速PCR定点突变
, C' c( P, u2 t* N32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
& G; U6 t# W" [33 流线型基因装配PCR
a7 R8 e0 E9 G/ O9 t附录1 专利/ A7 q2 P- B+ `: c
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰- O3 a- s! H& [6 c; o# h
附录3 注意事项
$ {* I8 v4 d, M$ f) E* ^附录4 供应商3 R3 Y5 `+ {$ ?+ v* G2 _% [
索引0 O9 {5 N; ~9 C5 v- h% A- u
: q, Z3 D& w q: t, L
8 k! w" L+ v6 _* q3 ~8 p, N$ q下载地址： V% s, ?. ]% E. H
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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发表于 2015-2-3 21:51:11
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