本帖转自:http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者:walkundersky6 h9 e4 O0 @3 E) L* A
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来,经过不断的开发和改进,现在已经广泛应用在诸多领域,是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。 R3 r; I! x- m. S+ k
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer:A Laboratory Manual第二版的影印本,是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿,是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进,从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧,无所不至,令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。9 O9 ] m- p p, T2 {6 n
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇,可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考,既是实验室必备的工具书,也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。. N4 @8 ?' a1 h/ ]7 y
( E/ D" ~+ ?$ C5 A* I3 B) A0 ~目录
; T/ T- u3 V! f6 d6 q" ^第1篇 PCR导论
) t+ o E' e1 |7 ^0 u2 P- Q1 建立一个PCR实验室
! @, e! V5 Z% @) u2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略4 b6 S0 \) I+ }$ p% }
3 高保真PCR酶
8 ~* ~8 \: p0 b8 Q+ y3 j, X4 PCR的最优化和常见问题解析2 w3 m0 F8 Z/ b2 {& W( g* I# ^& i
5 富含GC片段的PCR扩增# {" [% ^! b# z" y1 O- h) n" [
6 精确扩增大片段的技巧" ~5 `! H& f6 ?
7 PCR引物设计
$ p9 G8 X. \) `, M' L& ?7 J8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序+ S7 V0 [/ b8 n) p0 ]& W! t
第2篇 样品的制备1 b# C/ m! P! G& ~$ q
9 DNA的纯化6 m3 z! B" [% j- b
10 RNA的纯化5 I9 [! I6 W& Z" u) }& E# z' H
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
) P0 N( S9 H l. R12 克服PCR受抑制的策略
" g' E- @# H) p第3篇 RT-PCR方法$ k/ _- r& U$ B0 j% a0 o* `
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用0 I& v# @- l* U$ O" q- i
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
, R4 t. C; f! ~- L15 定量PCR的新技术
- P% u5 m7 I0 d/ ]8 J16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
/ ?5 l+ U! I2 [* b第4篇 PCR产物的检测:专门应用: U1 N/ v* I3 u. {* f& e3 R( j
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
5 ~- }" p! e+ H' |18 单链构象多态性分析4 O' {- h M4 F2 T! \& h
19 逆转录酶原位PCR
' v9 ~8 ~- l% F9 }# J. q20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
! N `: M l1 @& `# U第5篇 用PCR分析基因的差异表达) H Y1 G" @' C) v/ f; S4 o: C: @
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
6 ]6 A. w+ K1 W3 C7 Z8 u8 X22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
" J" l8 n! @/ V. @2 ]23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术) v# U0 v! U7 a( b8 d+ p0 z; v
第6篇 用PCR进行克隆
8 C0 o4 [- W! k' }: k8 O3 J: z! c24 以PCR为基础的文库筛选方法
H; G+ x1 e4 q25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进8 B/ r+ U% Y; k4 b5 R, y4 j
26 用PCR合成和分析DNA文库
6 P: ]" h2 e$ P9 p2 |2 C7 k. E; Y' l第7篇 PCR产物的克隆
; g; F9 K0 j) S27 克隆PCR产物的策略+ P/ K0 U; e4 v+ I6 R
28 PCR产物双向和定向克隆
. O: B' I/ k# T+ u29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建3 Q2 Z" g2 B" d6 O+ l8 d
第8篇 利用PCR进行诱变& Q' V; I+ U9 y* }# f$ t' V" ~
30 诱变PCR6 h. z) Q' ?5 {; _0 ]. w
31 快速PCR定点突变- C( Z; n8 Q4 X: O7 @7 P! \
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
: c5 u0 p/ Y1 W1 j$ H33 流线型基因装配PCR
! K- m0 N5 o" ]0 m附录1 专利
# h3 f2 M' L0 q4 H' I附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰) P" ~. S3 s* ~1 |/ O4 T+ z
附录3 注意事项 R3 P4 y6 L1 g
附录4 供应商4 V5 [( I; H1 n4 Q
索引 n9 [9 d9 n9 z6 v% g- S
$ k3 Z1 X+ y6 g2 u& G: j
" N y' j' [/ h5 E下载地址:
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