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屈公病(CHIKV)是由蚊子传播的疾病,会引起导致行动不便的严重的慢性关节痛。屈公病正在全球蔓延,且难以诊断,现有的大多数检验都很昂贵,开发新检验难度很大。
一种新方法可产生α病毒抗原,将其用于诊断测定可降低实际应用中的生产复杂度,提高灵敏度。这些嵌合病毒只对昆虫有作用,所以安全性高,可在工作台上安全地处理抗原。
美国德克萨斯大学医学部(Galveston, TX, USA)的科学家们及其同行成功使用了另一种经蚊子传播的病毒,人们对这种病毒知之甚少,研究得也少,用它制成的新检验产品能帮助医生和研究人员诊断和追踪屈公病的传播。这种以前未知的病毒现在被命名为埃拉特病毒(EILV),它与屈公病毒和蚊子携带的其它病毒有关,大约三十年前在以色列的内盖夫沙漠采得。该病毒只在蚊子体内复制,因此对人类和其它脊椎动物无害。
科研小组与美国华盛顿州西雅图的私营实验室InBios国际合作,用基于埃拉特病毒的嵌合体制成了一种安全易用的诊断检验。医疗工作者能够取疑似感染屈公病毒者的血清,用与InBios联合研制的诊断检验试剂盒做检验,不到两小时就可获得结果。为了测试该测定产品对于免疫球蛋白(IgM)酶联免疫吸附测定(ELISA)阳性对照物的效果,从经逆转录酶PCR诊断的CHIKV感染者身上获取蚀斑减数试验(PRNT)结果呈阳性的康复期血清,并使用五种IgM/ELISA的组合试剂。用作阴性对照的是登革病毒(DENV)阳性或委内瑞拉马脑炎病毒(VEEV)阳性但却呈CHIKV阴性的八份人血清样本。在美国分子器件公司(Molecular Devices; Sunnyvale, CA, USA)的VERSAmax可调式酶标仪上录得的ELISA吸收值是450纳米。
OD值在0.23到3.0之间的Anti-CHIKV IgM很容易检测到,而阴性对照产生的OD值均值为0.09。科学家们成功证明EILV/CHIKV在昆虫细胞里大量复制,无需灭活就可直接用于酶联免疫吸附测定,从而高度灵敏地检测最近和过去的CHIKV感染,效果优于传统的抗原制备法。他们还成功证明anti-CHIKV IgM和IgG ELISA能区分CHIKV引起的人类感染与VEEV或DENV引起的人类感染,且信号分离度很高。该研究的论文发表于2015年10月22日的《公共科学图书馆》杂志《被忽视的热带病》分册。
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