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最近,成都中医药大学、都江堰医学中心和成都诺恩生物科技有限公司(Nuoen)的研究人员,开发出一种最新的miRNA检测方法,可以帮助我们把microRNA转变成为强大的诊断标志物,并减少不适当的抗生素处方。
作为各种各样疾病的一种重要调节分子,microRNAs(miRNAs)用作非侵入性诊断生物标志物,已经显示出巨大的潜力,可能有一天被用于早期诊断和预后。然而,目前还没有一种miRNAs检测方法已被证明足够可靠地应用于临床。
这种新的miRNA检测方法——命名为miRNA衍生片段长度多态性(miRFLP),可以快速、准确地验证体液标本中的miRNA标记,以用于临床设置的疾病诊断。这一研究结果发表在最近的Nature子刊《Scientific Reports》。
本研究负责人徐凯(Kai Xu)指出:“相比较其他方法,miRFLP法为我们提供了一种可靠的miRNA检测方法,是唯一能够在不同种类粗样品中直接检测microRNA拷贝数的方法。这使我们能够在24小时的时间框架内,为患者提供测试结果。”
徐凯的研究小组发现,特定的miRNA往往通过在血液和其他体液中上调或下调,而反映各种不同的疾病。利用miRFLP技术,该实验室将可以将目标miRNA与合成RNA spike-ins组合,同时转换成不同大小的DNA片段。通过同时测量miRNA和RNA spike-ins,实验室可以从少量未纯化的血液样本中,直接获得目标miRNA拷贝。
通过实验,该研究团队最终发现,只需要0.2毫升的血清,就能精确地检测出低至每个样本中一个拷贝的目标miRNA数量。
徐凯解释说:“不同于其他的方法,我们利用PCR来同时扩增所有信号,利用毛细管电泳技术检测不同大小的片段及其荧光。我们用它来制作一个标准曲线,并测定每个目标microRNA数量,其余部分是一个程序,将它们转换为真实副本。”
新的方法能提供一个有价值的非侵入性替代方法,很快检测器官损伤、癌症、糖尿病和许多其他疾病。根据徐凯介绍,miRFLP的第一个临床试验,将与哮喘密切相关的microRNA表达上调,与患者细菌或病毒感染相关的microRNA区分开来。
徐凯说:“用一滴血,我们就可以告诉你是否患有哮喘、细菌感染或病毒感染。我们的测试法将给病人带来很多好处,并避免滥用抗生素,这是一个全球问题。”
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