本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky7 T# r7 Z K5 @$ C0 @6 \
, R/ e T+ m9 w( x6 k! G) C聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。6 n0 H2 c {0 J) v
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。7 m, R/ Y8 n, w$ v) R* i6 w
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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3 {, T, \ D, L, n4 @" C) \" Z目录
4 _* I: g0 a3 T2 p$ Q: X9 O第1篇 PCR导论
% H1 p6 N" x* v8 W* d1 v1 G1 建立一个PCR实验室- U& h6 {9 O2 \3 o7 u6 g
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略5 M0 m2 L: j0 H2 ^ {0 \4 T
3 高保真PCR酶
q, I9 y/ T6 ]% z; F5 K4 PCR的最优化和常见问题解析
$ M( Z3 w$ k k1 w! N5 富含GC片段的PCR扩增
' b% Y- K j: d3 |7 n0 I$ |6 精确扩增大片段的技巧
2 S, g0 B8 O P: Y7 PCR引物设计( O- x! `" ~6 o8 q. o- Z
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序$ \" j$ ^+ s% z) d' |7 R. r
第2篇 样品的制备1 A- ^$ H4 q8 A [
9 DNA的纯化% u! l5 J$ @8 n- J' q1 k, a4 G
10 RNA的纯化4 U7 |' E7 p0 k: y8 g0 e$ l( [6 r
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
8 P6 R; f2 j6 d! ]( }* E12 克服PCR受抑制的策略2 F2 D- G3 ? P5 ?
第3篇 RT-PCR方法
' m! J! B2 ~3 b4 I3 r13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用% u' r) _! q$ `4 j: I
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
. U) H4 ]0 ?$ e0 X0 [. N1 g2 y15 定量PCR的新技术, c4 x- l; @/ Y/ n/ |' H
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增5 F: E1 C# @5 g! g. E
第4篇 PCR产物的检测:专门应用" w' |. r4 X; Y9 d
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
4 n- _" G6 o) m6 k4 U/ C18 单链构象多态性分析$ H4 ^4 B: s4 ~$ U
19 逆转录酶原位PCR5 h8 j3 K. J5 v1 }' n8 T: `: m
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法- l2 a4 e" q' _ u7 Q4 l/ ]' M& d
第5篇 用PCR分析基因的差异表达0 I% J3 ~4 e! m, A# U
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用* l& I+ ?' \6 y# n- S8 t& c& [. D
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因$ `0 x+ m* J& U+ W. t
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
. H& u6 i+ g( N% w3 {! G第6篇 用PCR进行克隆
* c4 Z6 E% C2 \, }4 m2 t24 以PCR为基础的文库筛选方法
$ a& C2 F y' H7 E25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
, y) i* z& S& X26 用PCR合成和分析DNA文库
* \7 E7 ]6 N8 j' j) T) o第7篇 PCR产物的克隆
+ @) ^2 r r* f5 L) m( D, B+ \27 克隆PCR产物的策略
' B9 w/ l0 ?$ y- n* A28 PCR产物双向和定向克隆9 e$ p3 k8 W$ V
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建: m6 l# H' Z. d; A, _, W* i, E
第8篇 利用PCR进行诱变
- H$ B) Z) g8 i- @" E" B: j30 诱变PCR
5 h3 w3 `' h6 r* q6 p4 i% \" c31 快速PCR定点突变6 ]% g* W y) v: P' |
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因- K# e# m0 `$ a/ A" b4 I( h
33 流线型基因装配PCR3 S' r8 ?; t; }2 J U8 E
附录1 专利. l, G" x2 r/ z, q# v
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
& y; l% ?' Z' h; f( |6 C' l2 K- ?* `附录3 注意事项
3 U) g. M0 Y! c# d$ l" y/ Y1 M附录4 供应商
. K8 r! ~) J- D7 D/ {索引
! n) v& G* n( [. M. }$ @* |& h# z$ B- W8 C, [3 r3 n2 i
0 G7 ^! |- c! D2 t X' T; _
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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发表于 2015-2-3 21:51:11
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