本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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% ~- S2 O& x/ e. L9 q聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。" G& n- F, T K! F
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
* l2 W9 [5 P& a5 M 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
% `6 Z) r8 }' R& k) ]$ j/ V3 j# Z8 p1 Z/ ]
目录
7 }1 @0 e. |9 x$ J1 x5 p第1篇 PCR导论
1 y+ M3 V+ p. n1 建立一个PCR实验室: m5 n+ P% L) v6 E3 L
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
$ U5 ]( I7 c1 V5 Z5 u3 高保真PCR酶. O9 F* @: h0 Q* d% s. H% I
4 PCR的最优化和常见问题解析/ J6 x \; O7 y: S& c2 d/ S. [+ x
5 富含GC片段的PCR扩增
; G+ G: g8 K; B# J( x2 p+ l9 K6 精确扩增大片段的技巧
3 L$ s0 B0 }2 u) ]7 PCR引物设计, b9 `$ s S; O: l; @+ c# e' {
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序+ Z7 T) ^0 j8 K8 h. l
第2篇 样品的制备# U' r7 v% ]: M) Z. y# K
9 DNA的纯化
/ p. Z. q" n- x0 {10 RNA的纯化, x5 ~( b) r$ P4 G6 e* r3 E
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
4 Q! d$ J0 U, f" |9 e1 i, j12 克服PCR受抑制的策略" _7 n: n5 g1 s, } G1 o! q0 ?, w/ p
第3篇 RT-PCR方法) s3 G+ V" K2 w' E6 p$ {9 g; H
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用, \$ p! C6 \, r5 h& k
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler3 g8 i2 q, H" T: `9 c5 @3 D- C
15 定量PCR的新技术
3 Z4 o( p0 R& K. \5 U. R3 R; a16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
5 o& o0 n5 p) R第4篇 PCR产物的检测:专门应用4 d3 Z8 \" o) l, f1 B0 R8 w
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法4 ]5 @7 [ A* ^
18 单链构象多态性分析1 M/ F5 R2 K/ |/ V
19 逆转录酶原位PCR
8 b& O( u3 A/ v+ ]* D20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法7 M# v5 n0 ?, x7 ~7 V
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
% ~1 E) @5 i. f21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用( E+ U2 _* [) ]8 G
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
% ?# v c2 l8 ^ Q' r% i23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
3 e. w% m+ ]; {9 Q2 v第6篇 用PCR进行克隆- Q l1 o* N; t0 {1 b, S& e9 w
24 以PCR为基础的文库筛选方法2 p. u/ J" X% ^# d1 P5 }" I
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
3 H: Y% r9 U- @: I0 }# M26 用PCR合成和分析DNA文库9 } ?7 p5 C/ O# L
第7篇 PCR产物的克隆
4 q& g% S4 E3 h- l27 克隆PCR产物的策略
) e7 q4 Y4 K& L28 PCR产物双向和定向克隆3 T" d5 {7 J, k) ~
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
2 w; C7 L7 _1 z) m+ m$ v第8篇 利用PCR进行诱变" G$ i" g& D. g1 p, N$ z- M! M( @/ r
30 诱变PCR
. v; c: x8 H ]0 U9 v31 快速PCR定点突变
9 }' T) W: r& }9 R P5 ?- [9 F* P! b32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
2 v: y4 a P: _- i6 z33 流线型基因装配PCR( M$ I% Q8 U3 b% Y
附录1 专利2 j/ H" i" f- e' X- W+ r9 K" m
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰' y& @- [; K/ ]
附录3 注意事项
6 q# {' A4 z' g: I" A附录4 供应商
: [: X% z5 W1 \- J索引% M2 S8 o' [% t$ ~
+ K. _) d% L+ D# ?# t/ {5 a
/ e& i w, z! m8 H5 R3 b: R u下载地址：
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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发表于 2015-2-3 21:51:11
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