本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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- z& N/ G/ K5 C/ V% ~. U聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。1 b+ q8 S: |; `$ R1 b: f
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。& {8 T! W1 f* \4 E$ `: U$ Y( m
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。4 ?% ^7 e$ x3 n$ H" R5 i) H
' U9 u: Y; T& m+ P+ Q2 v目录
7 v5 w% a; Y& k第1篇 PCR导论6 }: m4 A: o$ G9 ?; h
1 建立一个PCR实验室
2 Y! h* V9 b4 S* W% q2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
. W' j, L1 A2 Z& K3 高保真PCR酶
. Z* |6 N" N& C- V+ `4 PCR的最优化和常见问题解析
! E5 O7 m, y7 E t. ` f9 ?5 富含GC片段的PCR扩增
2 h* r- i! N! C2 S! v6 精确扩增大片段的技巧0 C$ |. B5 i- l6 L( s' I1 a1 X! g
7 PCR引物设计2 w0 t7 c. Z9 Z6 S" |+ a
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序7 l$ S) h( w7 x3 N! I
第2篇 样品的制备
$ M# l& u! F# Z, u9 DNA的纯化
. Q" X. f/ c0 U% [/ [9 Q; l10 RNA的纯化$ E3 @% J) q: P" K0 u
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
+ o: f$ U$ N3 Z3 y( V4 c Q" f V12 克服PCR受抑制的策略
* f% u6 L& |8 Y% }- O2 o0 D第3篇 RT-PCR方法4 k. ~; y8 P8 y) }1 e0 I
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用" H2 x% Z* u T$ r
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler% A0 Q' U3 O% I, E
15 定量PCR的新技术1 ^: I# ^& K3 B7 a/ h+ ~
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
, @( o" ^" D6 T* u第4篇 PCR产物的检测:专门应用
v) Z% \) J5 {8 F17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法/ `. g7 V3 P f% i
18 单链构象多态性分析. e/ I5 W- f. _, ]8 U( l
19 逆转录酶原位PCR/ d+ j( G% Y4 W5 D6 I v+ k
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
8 U0 U) d' [7 q2 u }) P. [7 K第5篇 用PCR分析基因的差异表达( u3 F% h* S, @7 c% ^+ K6 W1 i/ L
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
, l5 c3 f: |* a! A22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因8 N: [% z2 x# e
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
& k" ]0 W4 J, C; b+ P* v, Z第6篇 用PCR进行克隆
3 c# W) {" _. \1 v24 以PCR为基础的文库筛选方法2 `0 T7 m f: w z3 h8 D/ j6 b7 w
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
, I A8 N) n/ E }26 用PCR合成和分析DNA文库
# M/ d1 E, ~, M) ^) k第7篇 PCR产物的克隆2 w; E$ f" [5 {" j4 @
27 克隆PCR产物的策略
- t) a5 g, }6 d- m+ q7 ]1 H9 Q28 PCR产物双向和定向克隆
' c+ y H6 L6 ^# c- f29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
6 r" m: v9 N. `+ t( C3 r: _第8篇 利用PCR进行诱变
2 f I" ^6 m1 ^# H! `4 G! \; p+ b30 诱变PCR
* }4 h4 ^0 q6 r( \) o2 P$ {31 快速PCR定点突变
" M% W( J% }& U9 }32 利用PCR来突变和合成新的重组基因 j; D( G6 |2 I7 k+ t# k; u
33 流线型基因装配PCR
4 \6 d. }5 F: d' b- X$ |附录1 专利
t8 i$ ?& \% }附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰: L) I w8 I8 N# F, P1 k9 R
附录3 注意事项" y0 U8 a9 e3 p7 j k( j* H3 x
附录4 供应商
" `( k+ ~( [& C+ `' }索引) S* ?+ O/ D. S2 y+ |4 P$ M
0 K' s, Y+ J& b& e! i
/ f3 D+ B5 p& \# T+ G7 ^' W
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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