本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky) @4 g6 n) X3 t. S5 R
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
9 a( v b. N/ ~' V$ x8 p 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。$ i. b O' n; ]0 j2 v
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。# Y- L: o3 X" m" x' N/ v
% l& u5 {( y5 @
目录
: y& f s/ B6 E6 [: B第1篇 PCR导论+ y, @7 t% e/ n+ a
1 建立一个PCR实验室; p9 \. C. O) ]0 w9 F t$ q A9 X
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略* R8 e0 p$ v; q; u6 ^ J
3 高保真PCR酶
( @0 o1 C, h9 F' e1 b# t. t K; y4 PCR的最优化和常见问题解析
- N I1 c8 A! S9 Z! g( j. E5 富含GC片段的PCR扩增3 T, L/ B; p" t2 N/ [
6 精确扩增大片段的技巧
- n; o: ]2 G4 q8 ?7 PCR引物设计
% X1 E. p' e; F. s8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序% i) ?% @+ O7 ]! [
第2篇 样品的制备+ l, o: V" f9 p5 r
9 DNA的纯化6 j: b( R+ F$ K, z1 T5 D$ z
10 RNA的纯化
* V0 H( `) D6 x+ \6 P5 I11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达- k. j# f/ v2 Z) q
12 克服PCR受抑制的策略
; j. X6 g" [7 `第3篇 RT-PCR方法0 h7 M f( {2 G$ }
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
$ W% U1 c. B( X% ?# j: [14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler1 X3 a) f7 X- d9 D3 O
15 定量PCR的新技术" J- e" F6 u$ [
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
+ t+ h( g# Z/ q, P第4篇 PCR产物的检测:专门应用
) p( a7 }$ k5 C2 m1 ~' [17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法" }3 G0 y) j: ]/ l$ W4 |
18 单链构象多态性分析% N: F0 Z7 x5 C+ Z
19 逆转录酶原位PCR
1 B+ Z D4 h6 ~+ v& y20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法* r( [: P# H, f* ]0 L
第5篇 用PCR分析基因的差异表达" H% W0 u, \+ z" ], i! ?
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用4 J% P. Q4 q3 }; v# M0 J L
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因0 r# A0 q1 A! A6 K, Q9 p
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术5 I* J7 O: a# j3 u
第6篇 用PCR进行克隆
+ E4 ]( y' M( e6 u8 s( i- F24 以PCR为基础的文库筛选方法
+ s ?$ F7 r% R p% Q9 F1 j6 A25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进5 s" P- V# a$ v$ N$ J' w
26 用PCR合成和分析DNA文库) ?1 [* y5 Q4 I& W6 \
第7篇 PCR产物的克隆- P5 w( T5 ?" O$ a- T2 @1 ~* R' T
27 克隆PCR产物的策略6 r. W& a8 Y! B$ \9 d- ~
28 PCR产物双向和定向克隆
0 X) f4 P+ {" C! b8 a$ w2 p9 \ Z29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建# N! e, {2 Z. y$ c+ G
第8篇 利用PCR进行诱变% r2 Y8 ?0 [3 Z9 w
30 诱变PCR
& X$ p! D, R5 n1 I- X31 快速PCR定点突变. i$ O+ O, z) @! |( |- k6 E w
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因, B; m6 a% D$ E3 @
33 流线型基因装配PCR
# r( ^' C: o$ e附录1 专利8 M8 o& x" X" h3 _
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰9 C z' q) T3 G( L. t
附录3 注意事项* n, C4 T/ B( h1 o4 F5 [1 q# ?' S
附录4 供应商: r( p, q/ u- c6 H
索引
6 V- g1 s0 t1 w7 E( ~3 ]* w6 p
' ~4 P8 A; ~0 u# b5 z+ ?# S. p/ j" X/ ~3 P$ L+ S
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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